3 概述
γ-谷氨酰轉肽酶(gamma glutamyl transferase,γ-GT或GGT)是一種肽轉移酶,催化γ-谷氨酰基的轉移,其天然供體是谷胱甘肽(GSH),受體是L-氨基酸。γ-GT分子量爲90kD,它在體內的主要功能是參與“γ-谷氨酰循環”,與氨基酸通過細胞膜的轉運及調節GSH的水平有關。人體各器官中按γ-GT含量多少依次爲腎、前列腺、胰、肝、盲腸和腦。血清中的γ-GT活性主要來自肝、膽系統,具有癌胚特性。但腎臟疾病時,血清中該酶活性增高不明顯,這可能與經尿排出有關。因此γ-GT主要用於消化系統疾病的輔助診斷。
4 胃液γ-谷氨酰轉移酶的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 胃液γ-谷氨酰轉移酶的測定原理
CGT催化L-γ谷氨酰-α-萘胺,使γ-谷氨酰基轉移到雙甘肽分子上,同時釋放出α-萘胺,後者與重氮試劑呈紅色反應。
4.5 試劑
(1)緩衝液(pH 8.0,25℃):稱取Tris 9.1g,雙甘肽3.96g,溶於400ml蒸餾水中,再加蒸餾水至500ml,加氯仿1ml,置冰箱保存。
(2)底物緩衝液(pH 7.8~7.9):稱取L-γ-谷氨酰-α-萘胺(無結晶水,MW272.3)217mg,置小燒杯中,加1mol/L HCl約4ml,待完全溶解後,再加上述Tris雙甘肽緩衝液90ml,於25℃用1mol/L HCl調節至pH 8.0±0.1,然後加水至100ml,置冰箱保存。
(3)2g/L對氨基苯磺酸醋酸溶液(含醋酸20%),置冰箱保存。
(5)顯色劑:取4液4ml,加3液100ml混勻,當天配製。
4.6 操作方法
使用比色操作法。
4.7 正常值
空腹胃液 <8U。
4.8 化驗結果臨牀意義
>8U:胃癌。
4.9 附註
比色法:
(1)緩衝液種類不同,酶反應的最適pH亦不同,以Tris緩衝液最爲適宜。
(2)底物緩衝液中游離的α-萘胺不穩定,且對酶有抑制作用。故配製時應注意溫度的影響,如試劑空白管吸光度>0.08,則應將L-γ-谷氨酰-α-萘胺重結晶,以除去遊離α-萘胺。
(4)標本易採用血清或體液,並可用EDTA-Na2(1mg/ml)抗凝血漿,其他抗凝劑可影響結果。
(5)GGT較穩定,室溫放置2天,4℃ 1周酶活力無變化,但65℃ 1min全部失活。