3 硫酸多黏菌素B藥典標準
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 漢語拼音
Liusuan Duonianjunsu B
3.1.3 英文名
Polymyxin B Sulfate
3.2 來源（名稱）、含量（效價）
本品爲多黏菌素B的硫酸鹽，按乾燥品計算，每1mg的效價不得少於6500多黏菌素B單位。
3.3 性狀
本品爲白色或類白色粉末；幾乎無臭；有引溼性。
本品在水中易溶，在乙醇中微溶。
3.3.1 比旋度
取本品，精密稱定，加水溶解並定量稀釋製成每1ml中約含20mg的溶液，依法測定（2010年版藥典二部附錄Ⅵ E），比旋度爲-78°至-90°。
3.4 鑑別
（1）取本品5mg，加鹽酸溶液（1→2）1ml，置安瓿中，熔封，在135℃加熱5小時，開啓安瓿，內容物移至蒸發皿中，置水浴中蒸乾，並繼續加熱至鹽酸的氣味完全消失，殘渣加水0.5ml使溶解，作爲供試品溶液；另取亮氨酸對照品、蘇氨酸對照品、苯丙氨酸對照品和絲氨酸對照品，分別加水製成每1ml中各含2mg的溶液，作爲對照品溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典二部附錄Ⅴ B）試驗，吸取上述五種溶液各5μl，分別點於同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以苯酚－水（75：25）爲展開劑（薄層板先在展開缸中飽和12小時以上），展開，於100～105℃乾燥，噴以茚三酮溶液（茚三酮1g溶於乙醇50ml及冰醋酸10ml中），在110℃加熱至條斑顯色清晰。供試品溶液中的條斑應與亮氨酸、蘇氨酸和苯丙氨酸對照品溶液中的條斑位置和顏色相同，在絲氨酸對照品溶液相應的位置應不顯條斑；供試品溶液在近原點上方應顯一條斑。
（2）在多黏菌素B組分項下記錄的色譜圖中，供試品溶液四個主組分峯的保留時間應與標準品溶液四個主組分峯的保留時間一致。
（3）本品的水溶液顯硫酸鹽的鑑別反應（2010年版藥典二部附錄Ⅲ）。
以上（1）、（2）兩項可選做一項。
3.5 檢查
3.5.1 酸度
取本品，加水製成每1ml中含20mg的溶液，依法測定（2010年版藥典二部附錄Ⅵ H），pH值應爲5.0～7.0。
3.5.2 溶液的澄清度與顏色
取本品5份，分別加水製成每1ml中含50000單位的溶液，溶液應澄清無色（2010年版藥典二部附錄Ⅸ B，Ⅸ A第一法）。
3.5.3 硫酸鹽
[1]取本品約0.250g，精密稱定，加水100ml使溶解，用濃氨溶液調節pH值至11，精密加氯化鋇滴定液（0.1mol/L） 10ml及酞紫指示液5滴，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L）滴定，注意保持滴定過程中的pH值爲11，滴定至紫色開始消褪，加乙醇50ml，繼續滴定至紫藍色消失，並將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氯化鋇滴定液（0.1mol/L）相當於9.606mg硫酸鹽（SO4）。本品含硫酸鹽按無水物計算應爲15.5%～17.5%。
3.5.4 有關物質
在多黏菌素B組分項下記錄的供試品溶液的色譜圖中如有雜質峯，按面積歸一化法計算，單個雜質不得過3.0%，雜質總量不得過17.0%。供試品溶液色譜圖中任何小於對照溶液（b）主峯面積0.7倍的峯可忽略不計。
3.5.5 苯丙氨酸
取本品約0.375g，精密稱定，置100ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解並稀釋至刻度，搖勻。照紫外－可見分光光度法（2010年版藥典二部附錄Ⅳ A），在264nm （A264）、258nm （A258）和252nm（A252）、280nm （A280）和300nm（A300）的波長處分別測定吸光度。按下式計算硫酸多黏菌素B中的苯丙氨酸的百分含量（%）：
（9.4787/W） （A258-0.5A252+0.5A264-1.84A280+0.8A300）
式中W爲硫酸多黏菌素B供試品的重量（g）。
3.5.6 乾燥失重
取本品，以五氧化二磷爲乾燥劑，在60℃減壓乾燥3小時，減失重量不得過6.0%（2010年版藥典二部附錄Ⅷ L）。
3.5.7 熾灼殘渣
取本品1.0g，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ N），遺留殘渣不得過0.75%。
3.5.8 重金屬
取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅷ H第二法），含重金屬不得過百萬分之二十。
3.5.9 多黏菌素B組分
照高效液相色譜法（2010年版藥典二部附錄Ⅴ D）測定。
3.5.9.1 色譜條件與系統適用性試驗
用十八烷基硅烷鍵合硅膠爲填充劑；以硫酸鈉溶液（取4.46g無水硫酸鈉溶解在900ml水中，用稀磷酸調節pH值至2.3後用水稀釋至1000ml）－乙腈（80：20）爲流動相；柱溫30℃；檢測波長爲215nm。多黏菌素B1的保留時間約爲35分鐘，多黏菌素B2和多黏菌素B3峯的分離度應不小於3.0。
3.5.9.2 測定法
取本品50mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加水－乙腈（80：20）溶解並定量稀釋至刻度，搖勻，作爲供試品溶液。另精密稱取多黏菌素B標準品50mg，置100ml量瓶中，加水－乙腈（80：20）溶解並定量稀釋至刻度，搖勻，作爲對照溶液（a）；精密量取對照溶液（a）1ml，置100ml量瓶中，用水－乙腈（80：20）稀釋至刻度，搖勻，作爲對照溶液（b）。精密量取上述三種溶液各20μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至最大組分多黏菌素B1峯保留時間的1.4倍。色譜圖中多黏菌素B2、多黏菌素B3、多黏菌素B1-Ⅰ、多黏菌素B1的相對保留時間分別約爲0.5、0.55、0.8、1.0。按外標法以相應峯面積計算，按乾燥品計，多黏菌素B3的含量不得過6.0%，多黏菌素B1-Ⅰ的含量不得過15.0%，多黏菌素B1，B2，B3和B1-Ⅰ的總含量不得少於80%。
3.5.10 可見異物
取本品5份，分別加微粒檢查用水溶解，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅸ H），應符合規定。
3.5.11 不溶性微粒
取本品3份，分別加微粒檢查用水溶解，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅸ C），每1g樣品中，含10μm以上的微粒不得過6000粒，含25μm以上的微粒不得過600粒。
3.5.12 熱原
取本品，加滅菌注射用水製成每1ml中含2萬單位的溶液，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅺ D），劑量按家兔體重每1kg注射1ml，應符合規定。
3.5.13 無菌
取本品，用適宜溶劑溶解，轉移至不少於500ml的0.9%無菌氯化鈉溶液中，用薄膜過濾法處理後，依法檢查（2010年版藥典二部附錄Ⅺ H），應符合規定。
3.6 含量測定
精密稱取本品適量，加滅菌水溶解並定量制成每1ml中約含1萬單位的溶液，照抗生素微生物檢定法（2010年版藥典二部附錄Ⅺ A）測定。1萬多黏菌素B單位相當於1mg多黏菌素B。
3.7 類別
3.8 貯藏
3.9 製劑
3.10 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版
4 參考資料
- ^ [1] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典：2010年版：第一增補本[M]．北京：中國醫藥科技出版社，2010．