1 概述
核抗原有3個組成部分：組蛋白、DNA、可溶性核抗原，後者因可溶於磷酸鹽緩衝液（或生理鹽水）中。故名可提取的核抗原（extractable nuclear antigen，ENA）。從分子水平識別ENA多肽抗體足20世紀80年代抗核抗體研究的重大進展，現已發現這類抗體有10餘種，抗ENA抗體爲其總稱。
3 抗浸出性核抗原抗體的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 取材
3.4 抗浸出性核抗原抗體的測定原理
（1）對流免疫電泳法：爲經典的檢測抗ENA抗體（主要包括抗RNP和抗Sm兩種抗體）的方法。其原理是於瓊脂糖凝膠板成對打孔，將待測血清加至陽極側孔內，於電場中泳動20min，再於陰極側孔內加ENA抗原．繼續電泳30min，若待測血清中有相應的抗體存在，即可在兩孔之間的適當位置形成沉澱線。據此來判斷抗ENA抗體的有無。該法主要用於檢測抗Sm和抗U1-RNP抗體，其優點是較瓊脂糖擴散法敏感、快速，可於2h觀察結果。
（2）免疫印跡法：將ENA抗原進行聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），使所含多肽抗原分離；再用電轉印法將抗原轉印於硝酸纖維素膜上。將待測血清與膜條上的抗原反應，用酶標記抗人IgG作爲二抗，加酶底物溶液顯色。根據膜條上顯色區帶的位置，參比陽性對照，即可判斷有無某種抗ENA多肽抗體的存在。此法可一次檢測抗Sm、抗U1-RNP、抗SS-A、抗SS-B、抗Jo-1、抗Scl-70和抗核糖體（Rib）等7種多肽抗體。
（3）間接免疫熒光法：實驗基質多采用Hcp-2細胞或靈長類動物肝臟的冷凍切片，其原理可參看本章抗核抗體測定，分別出現各自特定的免疫熒光模式（表1）。
3.5 試劑
3.6 操作方法
3.7 正常值
3.8 化驗結果臨牀意義
抗Sm抗體和抗dsDNA一樣，對SLE有高度特異性，且不論是否活動期，抗Sm均可陽性，可作爲SLE的標誌性抗體。但SLE患者中抗Sm陽性者僅佔30%左右（20%～40%），故抗Sm陰性時不能排除SLE診斷，抗Sm抗體與臨牀症狀和疾病轉歸之間的關係迄今尚無一致意見。抗U1-RNP自身抗體在多種風溼病患者血中均可檢出，SLE患者的陽性率30%～50%；全身性進行性硬化症（PSS）25%～30%；皮肌炎10%～20%，類風溼性關節炎5%～10%，而在混合性結締組織病（MCTD）患者，高滴度的抗U1-RNP抗體檢出率可達100%，這些患者常無其他特異性的自身抗體。因此，高滴度的抗U1-RNP（尤其是高滴度的抗70kD）抗體被認爲是MCTD的診斷標誌。抗U1-RNP抗體（抗70kD）陽性與肌炎、食管運動功能障礙、雷諾現象相關，但陽性患者多不發生腎炎。抗SS-A/Ro抗體與幾種自身免疫病相關。最常見於乾燥綜合徵（40%～95%的病例），也見於系統性紅斑狼瘡（20%～60%）及原發性膽汁性肝硬化（20%），偶見於慢性活動性肝炎。抗SS-B/La抗體幾乎僅見於女性患者（29∶1），可出現在乾燥綜合徵（40%～95%的患者）及系統性紅斑狼瘡（10%～20%）患者。在乾燥綜合徵者中，抗SS-A/Ro抗體和抗SS-B/La抗體幾乎總是同時出現。因此抗SS-A和抗SS-B又被認爲是乾燥綜合徵的標誌性抗體。抗Scl-70抗體主要見於全身性進行性硬化症（PSS）中的瀰漫型。是該病的標誌性抗體，其陽性率25%～70%，在重型瀰漫型硬皮病患者可高達75%，在CREST綜合徵患者抗Scl-70檢出率僅4%～11%，此抗體陽性者抗着絲粒抗體多爲陰性。侷限型硬皮病患者，此抗體檢出率很低，僅約20%。抗Jo-1對多發性肌炎（PM）和皮肌炎（DM）有一定價值；抗核糖體（Rib）抗體主要出現於SLE，有人認爲也可作爲SLE標誌抗體，爲狼瘡活動的指標。系統性紅斑狼瘡（SLE）約50%具有抗ENA抗體，主要是抗Sm抗體，而混合結締組織病者呈高頻率，高效價的抗ENA抗體，主要是針對核糖蛋白。若用核糖核酸酶處理ENA，核糖蛋白即被酶解，而Sm抗原不受影響，所以系統性紅斑狼瘡仍保持陽性，而混合結締組織病不再表現抗體活性。Sm抗原對SLE有特異性，對具有抗DNA抗體的患者，若同時具有抗ENA抗體，其預後較好。
3.9 附註
（1）在用對流免疫電泳法檢測時，待測血清如含抗U1-RNP和抗Sm兩種抗體，與ENA孔之間可出現兩條沉澱線。靠近陰極側的代表抗U1-RNP抗體，靠近陽極側的代表抗Sm抗體。如只出現一條沉澱線。則需與陽性對照血清參比。以判定其性質。由於Sm抗原可耐56℃ 1h的處理。U1-RNP則否，故也可將ENA抗原加熱處理後再與待測血清作對流免疫電泳，即可判定沉澱線性質。也有文獻報道，應用核糖核酸酶處理U1-RNP。以區別抗Sm或抗U1-RNP抗體。
（2）免疫印跡法的優點是一次可同時檢測7種多肽抗體，但其與對流免疫電泳法或瓊脂雙向擴散法比較，陽性率並無顯著提高（主要原因是其作用的靶抗原多經過熱變性處理，使得原先存在於分子表面的抗原表位發生了改變）。因此相應多肽抗體陰性，並不能排除某種風溼病的存在。