4 骨髓巨核細胞數和分類的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 骨髓巨核細胞數和分類的測定原理
採用骨髓小粒豐富，製片厚薄均勻的塗片，經瑞氏-姬姆薩混合染色後於顯微鏡下檢查細胞質和量的變化。
4.5 試劑
（1）瑞氏染色液：瑞氏染粉1g，置潔淨乾燥的研鉢內，加甘油3～5ml，研磨片刻，使瑞氏染粉充分溶解，加甲醇約50ml，繼續研磨片刻後，收集上層染液；殘餘部分再加甲醇50ml研磨，再收集上層染液，重複幾次後，用甲醇沖洗研鉢，倒入同一瓶內，最後加甲醇至500ml。開始幾周應經常振搖染色液。染色液存放的時間越長，染色效果也越佳。此外，研磨時染粉內應先加甘油，以免染粉在研磨過程中結成塊，更易溶解。染粉未經研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色。
（2）姬姆薩濃縮染液：將姬姆薩染粉3.8g放入純甘油250ml中，置60℃水浴2h，溶解後加60℃預熱的甲醇250ml混勻，於室溫，棕色瓶內保存，配後數天即可使用，可長期保存。
（3）pH6.5磷酸鹽緩衝液：磷酸二氫鉀1.5g，磷酸氫二鈉1.0g，加蒸餾水到5000ml。最後糾正pH6.5。
（4）姬姆薩稀釋液：取姬姆薩溶液50ml，加pH6.5磷酸鹽緩衝液到500ml，混勻。此液爲姬姆薩應用液，可直接作塗片復染用。作瑞氏稀釋液時，取此液10～20ml加蒸餾水至100ml，混勻即可。
4.6 操作方法
（1）骨髓取材：取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或後嵴等。兩歲以內小孩最好用脛骨，成人常取髂後上棘，此部位穿刺方便，病人也易接受。穿刺前要求嚴格消毒，杜絕細菌感染，除穿刺室紫外線消毒和皮膚消毒外，還應注意穿刺包和手套消毒時間有否過期。戴手套要熟練，避免手套接觸未消毒物品。穿刺針進入髓腔時常有脫空感，吸取前針筒內應留有1ml左右的空隙，否則髓液很快進入針筒空隙而無法取出。針筒內若有水份也要用消毒紗布擦乾，以免溶解細胞。吸液量一般控制在0.2ml左右，因吸量過多，易被外周血稀釋。部分病人幹抽或吸出量太少時，不要將針頭立即拔出，可邊抽邊調節針頭深淺，或邊抽邊緩慢外移針頭，最後將針頭內可能殘留的髓液儘量推出、製片，以減少病人痛苦。
（2）塗片：骨髓取出後應立即注在一塊斜放的玻片上，使多餘的外周血自然下流，用推片刮取上部較多小粒的髓液在另一干淨玻片上推片。玻片最好事先經稀硝酸液浸泡後用水沖洗，然後用蒸餾水浸泡，應避免用鐵鏽的烤箱烘烤或用鐵絲筐盛放，以減少由鐵劑污染而造成的鐵染色假陽性。同時，做過細菌檢查的玻片，最好不要再用於骨髓片檢查。
（3）染色：選兩塊小粒較多、厚薄均勻的骨髓片，自然乾燥後在較厚的頭端髓膜上寫上病人姓名、日期及“BM”標記。加瑞氏染色液8～12滴，用吸球吹吸並使其佈滿整張塗片，約半分鐘後加姬姆薩稀釋液5～10滴，再用吸球吹吸氣，使兩液充分混勻，若有金黃色油膜出現，染色效果更佳。染色時間一般爲10～20min，夏天可縮短些、冬天則可延長些。沖洗時應平放玻片讓流水緩慢沖洗。另外，因手拿玻片處可能會有染料殘留，應更換手拿位置再予沖洗。染色太淡的塗片，可用姬姆薩稀釋液復染3min；着色太深時，可用瑞氏染液滴加於塗片上，立即沖洗即可。各實驗室最好能摸索出自己的染色經驗，儘量做到一次性染色成功。沒有姬姆薩染液的單位，可用蒸餾水加少量天青（或美藍）代替，但染色效果沒有前者好。染好的塗片要自然乾燥後鏡檢。
4.7 正常值
總數：7～35/（1.5×3cm）2[7～35個/（1.5×3cm）2]
分類：
原始型：0 （0%）
早幼型：0～0.05 （0～5%）
中幼型：0.10～0.27 （10%～27%）
晚幼型：0.44～0.60 （44%～60%）
裸核： 0.08～0.30 （8%～30%）
變性： 0.02（2%）。
4.8 化驗結果臨牀意義
（1）增多：慢性粒細胞白血病、真性紅細胞增多症、原發性血小板增多症、骨髓纖維化症、脾功能亢進、急性大出血等。
（2）減少：急慢性再生障礙性貧血、各種急性白血病、血小板減少性紫癜、陣發性睡眠性血紅蛋白尿症等。
4.9 附註
（2）抽取骨髓液後應立即塗片，防止凝固。
（3）在骨穿刺的同時，應取患者末梢血製片2張以上並同時送檢。
4.10 相關疾病
真性紅細胞增多症、原發性血小板增多症、脾功能亢進、再生障礙性貧血、血小板減少性紫癜、陣發性睡眠性血紅蛋白尿、骨髓細胞形態