CRAF
CRAF（也称为 RAF-1）是 RAF激酶家族（包括 ARAF, BRAF, CRAF）中第一个被鉴定的成员，由 RAF1 基因编码。作为 RAS/MAPK 信号级联的关键中继节点，CRAF 负责接收来自活化态 RAS-GTP 的信号，并通过磷酸化下游 MEK1/2 调节细胞增殖、分化及凋亡。尽管 CRAF 在肿瘤中的直接突变率低于 BRAF，但它在介导 获得性耐药 及 矛盾激活（Paradoxical Activation）中起着决定性作用。当 BRAF 被抑制时，CRAF 往往通过形成异源二聚体来代偿信号，成为维持肿瘤生存的“备用引擎”。
分子生化机制：多步级联与二聚化激活
CRAF 的激活是一个涉及空间定位、变构调节和磷酸化循环的复杂过程：
- 膜募集 (Recruitment)： 处于失活态的 CRAF 被胞浆中的 14-3-3蛋白 钳制。当 RAS-GTP 结合胞膜上的受体后，它会通过 RBD（Ras 结合域）将 CRAF 招募至细胞膜。
- 磷酸化激活： 在膜表面，CRAF 必须在 Ser338 和 Tyr341 等位点被磷酸化才能获得全激酶活性。这通常由 PAK 激酶或 SRC 协同完成。
- 二聚化驱动： 不同于 BRAF 常以单体发挥功能，CRAF 高度依赖于 二聚化（包括 CRAF 同源二聚或 BRAF/CRAF 异源二聚）。这种物理互作是信号向 MEK 传递的生化前提。
临床景观：肿瘤耐药中的矛盾激活中枢
在临床实践中，CRAF 因其介导的“矛盾激活”效应而备受关注：
| 病理生理特征 | 生化分子背景 | 临床解析 |
|---|---|---|
| 矛盾激活效应 | RAS突变 背景下，BRAF 抑制剂诱导 BRAF 与 CRAF 二聚化。 | 导致 MAPK通路 反常激活，引发皮肤鳞状细胞癌等次生病变。 |
| 获得性耐药 | BRAF V600E 抑制后，CRAF 表达上调或通过 旁路信号 激活。 | 黑色素瘤患者在长期治疗后出现的通用逃逸路径之一。 |
| 融合变异 | CRAF融合 (如 KIAA1549-RAF1)。 | 在部分低级别胶质瘤中作为主要驱动基因，展现出极强的成瘤性。 |
治疗策略：泛 RAF 与二聚体抑制
针对 CRAF 及其诱导的二聚体信号，新一代药物设计旨在实现更彻底的封锁：
- 泛 RAF 抑制剂 (Pan-RAF Inhibitors)： 如 Belvarafenib。这类药物旨在同时结合 BRAF 和 CRAF，并抑制它们的二聚体活性，从而规避矛盾激活，适用于 RAS突变 实体瘤。
- 垂直联合封锁： 联合 MEK抑制剂（如曲美替尼）是目前的标准方案。通过下游拦截，可以显著中和由 CRAF 带来的代偿性信号反弹。
- PROTAC 降解技术： 正在探索的 CRAF降解剂 旨在通过彻底清除蛋白质，消除其作为 支架蛋白 在旁路耐药中的物理存在。
关键关联概念
- BRAF： CRAF 的同家族伙伴，两者形成的异源二聚体是通路的超级引擎。
- RAS-GTP： CRAF 膜募集的直接化学诱导剂。
- 矛盾激活： 描述为何某些靶向药在特定背景下“促癌”的核心药理概念。
- MEK1/2： CRAF 唯一的直接生化底物。
学术参考文献与权威点评
[1] Wellbrock C, et al. (2004). The RAF proteins take centre stage. Nature Reviews Molecular Cell Biology.
[学术点评]：该综述奠定了理解 ARAF/BRAF/CRAF 功能差异化及协同作用的理论基石。
[2] Hatzivassiliou G, et al. (2010). RAF inhibitors prime wild-type RAF to activate the MAPK pathway. Nature.
[学术点评]：里程碑式发现。揭示了 CRAF 介导“矛盾激活”的分子逻辑，改变了 RAF 抑制剂的使用范式。
[3] Holderfield M, et al. (2014). Targeting RAF kinases in cancer: the road to the clinic. Nature Reviews Cancer.
[学术点评]：系统论述了针对二聚体界面的新一代抑制剂如何通过干扰 CRAF 复合体来克服耐药。