4 血清乳糖医学检查
4.1 英文名
Lactose
4.2 别名
Lac
4.3 分类
4.4 化验取材
4.5 化验方法
糖类测定
4.6 原理
在已糖激酶催化下，葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）催化下脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸（6-GP），同时使NADP＋还原成NADPH。反应式如下：
根据反应方程式，NADPH的生成速率与乳糖浓度呈正比，在波长340nm监测吸光度升高速率，计算血清中乳糖浓度。
4.7 试剂
（1）酶混合试剂的成分与浓度：
缓冲液（pH7.5） 50mmol/L
MgSO4 2mmol/L
ATP 2.0mmol/L
NADP＋ 2.0mmol/L
HK ≥1500U/L
G6PD 2500U/L
根据试剂盒介绍复溶后，混合配制成酶试剂，置棕色瓶中放冰箱保存，约可稳定7天。
（2）5mmol/L乳糖标准应用液：见GOD法。
4.8 操作方法
（1）速率法测定（以半自动分析仪为例）：
①主要参数：
系数 8.2
孵育时间 30s
监测时间 60s
波长 340nm
吸样量 0.5ml
温度 37℃
②加样：37℃预温酶混合试剂1000μl，加血清20μl，立即吸入自动分析仪，监测吸光度升高速率（△A/min）。
③计算：
（2）终点法测定：取16mm×100mm试管，按表1编号与操作。
以上各管充分混匀，在37℃水浴，准确放置10min，分光光度计波长340nm、比色杯光径10mm，用蒸馏水调零，分别读取各管吸光度（Au、Ac、As、Ab）。
4.9 正常值
酶法：＜14.6μmol/L。