4 唾液白蛋白的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 唾液白蛋白的測定原理
激光散射光係指一定波長的光通過溶液時遇到抗原-抗體複合物，光線被折射，發生偏轉。偏轉角度可以從0～90°，這種偏轉的角度可因光線波長和離子大小不同而有所區別。散射光的強度與抗原抗體複合物的量成正比，同時也和散射夾角成正比，和波長呈反比。測定方法有終點法和速率法兩種。
4.5 試劑
（1）稀釋液：0.2mol/L Na2HPO463ml，0.2mol/L NaH2PO437ml，0.5mol/L NaCl 100ml，NaN21.0g，蒸餾水加至1000ml，經0.45μm微孔濾膜過濾，分裝，4℃保存備用。
（2）反應液：聚乙二醇（PEG，分子量6000）4.6g溶於稀釋液中，略微加熱助溶，補足100ml，用0.45μm微孔濾膜過濾分裝。4℃保存備用。
（3）校正唾液：自制校正唾液時，可根據ICS校正卡上所列各種蛋白成分的含量，應用國產標準參考唾液，根據公式C1V1＝C2V2換算成校正卡上含量，略作調正。使與校正卡上含量一致，然後過濾分裝，低溫保存。
（4）質控唾液：可將數十份正常人唾液混合，加1g/L NaN3，直接用C或D稀釋度即可。
（5）抗血清：可用國內特異性好，親和力強，效價高的抗血清，選擇最適稀釋度，用0.45μm微孔濾膜過濾。以已知含量參考血清作爲標準抗原，用ICS手動或自動方式測出該成分的含量，使與校正卡上所列含量一致，然後分裝4℃保存。
4.6 操作方法
（1）自動速率散射比濁法：以Beckman ICS-Ⅱ型爲例，可用進口配套試劑，也可用自制試劑，經校正後使用，按照操作介紹進行。現以免疫球蛋白G（IgG）爲例。
①先用電腦稀釋器將待測樣本稀釋至1∶36或1∶216。
②將待測的IgG校正電腦卡及IgG的抗血清電腦卡先後插入儀器內，有關的試驗參數及標準曲線即自動記錄在微處理機中。
④用42μl加樣器將欲測定的稀釋標本和IgG抗血清分別注入反應管中，透過顯示屏，於60s內自動顯示IgG的含量。
（2）手動散射比濁測定法：由於自動試劑受到許多限制，手動操作可替代自動試劑，對於微量蛋白質測定的繼續開發是十分重要的。
①抗原製備：爲了確定抗血清的使用比例，須確定最適合的抗原含量。ICS最佳檢測範圍應是0.2～20mg/L之間，最適抗原中點濃度爲2mg/L（指反應管中的終濃度）。其計算公式爲：
稀釋倍數＝
例如：參考唾液IgG值爲12g/L時代入公式則
將參考唾液用稀釋液稀釋後，備用，並以同樣方法配製其他濃度，選擇多點，製作校正曲線。該樣品應清澈透明，其本底速率值（RU）不應超過50，散射值（SU）不應超過30，才爲合用。
②抗血清製備：取特異性強。效價高的抗血清進行適當稀釋，經0.45μm微孔濾膜過濾後，選擇最適增益卡（M11、M22、M33、M44），以已知含量的參考血清作爲標準抗原，用手動方式將ICS專用抗血清與自制抗血清對同一抗原，測其速率單位（RU）。以自制抗血清的RU除以Beckman抗血清的RU，即爲自制抗血清的稀釋倍數。如上海生物製品研究所生產的抗血清（批號890201），其抗IgG 1∶15稀釋，抗IgA 1∶6稀釋，抗IgM 1∶21稀釋較佳。
③參考曲線的製備：將已知抗原稀釋成不同濃度，分別與抗血清反應，測定的RU值爲縱座標，相應的抗原濃度爲橫座標、劃曲線。
④標本測定：所有體液皆可測定，一般血清標本可按反應管中最佳檢測濃度稀釋。腦脊液（CSF）可不作稀釋，直接測定，測得RU值查標準曲線所得mg數乘以稀釋倍數即爲標本測量值。
（3）手動速率散射比濁法：表1。
完成上面操作後，即完成一次樣品測定，另測標本時再重複6～10步驟操作。取得的速率值查校正曲線，即得未知標本濃度。
4.7 正常值
＜10mg/L。
4.8 化驗結果臨牀意義
當唾液腺患炎症、腫瘤等時，血液唾液屏障被破壞，血漿白蛋白蛋白進入唾液，白蛋白增高。口眼乾燥綜合徵（Sjogren綜合徵）患者唾液白蛋白增高與腺體破壞程度呈正相關。
4.9 附註
（1）當60g/L的白蛋白標準與BCG結合後，溶液光徑1cm，在630nm處測定吸光度應爲0.811±0.035，如達不到此值，表示靈敏度較差。