4 體內血小板活化標誌物的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 體內血小板活化標誌物的測定原理
β-血栓球蛋白(β-TG),血小板4因子(PF-4):PF-4及β-TG是血小板特異性蛋白,包含在血小板α-粒中,血小板活化時被釋放出來,並用酶免或放免法可測得血漿中的含量。
活化血小板免疫細胞學測定法:血小板活化後導致多種活化的腫瘤依賴抗原表達。P-選擇素(CD62p)在血小板分泌時從α-粒細胞膜移至血小板外膜。其他腫瘤抗原如CD64被激活的GPⅡb/Ⅲa複合物,腺體誘導結合位點(LIBS),受體誘導結合位點(RIBS)標記。腫瘤抗原免疫標記後,基於特殊的免疫熒光及被特殊化的如血小板標記物的陽性百分比,活化的血小板可用免疫細胞學法識別出來。
4.5 試劑
β-TG和PF-4:血液抗凝需使用特殊的混合劑。混合劑可外購,每個試驗室也可自行生產。包括血小板抑制物如前列腺素E1和腺苷。乏血小板血漿是在嚴格的冰凍條件下通過離心法從抗凝血中提取出來的。
4.6 操作方法
酶免式放射免疫法式。
4.7 正常值
β-TG ~35μg/L
PF-4 ~15μg/L
p-選擇素表達(CD62p) ≤4%
CD63表達 ≤4%
4.8 化驗結果臨牀意義
血漿中β-TG和PF-4升高可見於以下情況:人工心臟瓣膜、冠心病、急性心肌梗死、糖尿病、外周靜脈閉塞及肺動脈栓塞。在其他急性腦梗死或其他動脈血栓疾病中血漿中升高達正常人6~10倍。這一濃度代表正常血小板濃度下1%血小板中β-TG、PF-4的含量。提示本方法或許反應因採集技術不良或血樣處理不當時的血小板活性。例如僅1/1000血小板釋放其顆粒成分,可導致血漿中β-TG和PF-4水平上升2倍。
循環中活化的血小板免疫細胞學測量提示特別在心血管及血栓形成疾病中的上升情況。有一不肯定研究顯示循環中活化的血小板數量是冠狀動脈球囊擴張術(PTCA)後早期再灌注的預後因素。
4.9 附註
檢測到體內活化血小板的一個關鍵問題是防止血液收集過程中及收集後的人爲血小板活化。通過採用標準血樣混合劑、遵守適當的血液收集規則可減少測量β-TG、PF-4方法中人爲的血小板活化。進一步講,β-TG、PF-4經腎臟代謝,因此兩者血漿濃度依賴腎功能。目前沒有一個公認的樣本指南用以檢測循環中活化的血小板。然而樣本採集後被直接與甲醛混合的穩定作用將符合以下規則:
(2)無抗原破壞。