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DNAMarker电泳常见问题分析
Q：为什么marker条带非常模糊，无法辨别具体条带？ A：出现上述情况，可能有以下几个原因：1.marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染；2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后，离子浓度降低，pH...
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DNAMarker电泳常见问题分析
Q：为什么marker条带非常模糊，无法辨别具体条带？ A：出现上述情况，可能有以下几个原因：1.marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染；2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后，离子浓度降低，pH...
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在小鼠活体内显示着色条带的实验研究
【摘要】目的在小鼠经络线上显示蛋白条带。方法根据经脉线低阻抗的特点和本研究者关于经络实质是“蛋白桥接”假说的概念，采用特殊配方的染液，结合离子电泳技术，在小鼠活体内进行染液离子电泳示踪。结果在小鼠的筋...
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养鳖全年各月管理要点
...过滤方法净化水质。在保持养鳖用水温度的同时，要注意投饵，加快稚鳖生长。二月管理基本与1月份相同。主要是保持适宜的水温和注意水质变化，因为在冬季加温养殖中照常投饵，水质极易变坏，有时会变得恶臭，需随时进...
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PCR问题的总结
...大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 pcr反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及活性④pcr循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板...
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鲍鱼养殖技术
...将幼鲍放置鲍鱼养殖笼中，然后固定在浮笼上养殖，定时投饵，清除粪便杂质、残饵，洗刷污泥，疏通水流。 （３）池塘养殖：条件具备的地区，可在陆地建池，采用流水和充气养殖。 （４）工厂化养殖：建鲍鱼养殖室...
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RAPD扩增分枝杆菌DNA优化条件及菌型分型的诊断应用
...件，并分别扩增深圳市临床病人分离株DNA，对比RAPD电泳条带特征。结果以条带稳定、丰富、清晰为标准，确定引物1RAPD最佳反应条件为:50μl反应体系中，含100ng模板DNA，2.5mmol/LMgCl2，2UDNA聚合酶，引物0.5μmol/L，dATP、dGTP、dCTP和dTTP...
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分子生物学试验方法探讨四－PCR常见问题
...大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中...
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PCRTroubleshootingguide
1．假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶...
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椎间盘源性下腰痛的发病机制
...特征表现为，一条从髓核至纤维环外层的血管化肉芽组织条带区，其间伴有1个或多个裂隙；肉芽组织条带区与椎间盘造影术后CT上显示的纤维环裂隙一致，肉芽组织之外的纤维环结构基本正常。生理老化椎间盘和正常对照椎间盘...
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差异表达基因克隆技术的新进展
...PCR扩增，其产物经测序胶显示出来，再回收鉴定克隆差异条带。1992年Liang和Pardee[1]建立此技术时，5´端采用20条随机引物，每条由10个碱基组成，3´端采用12条引物即T12MN(M=A、C或G，N=A、G、C、T)。这种组合从统计学上几乎...
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16S～23SrDNA间隔区序列PCR和RFLP分析对分枝杆菌复合菌群鉴定的研究
...而引物b对受试各菌进行扩增，只有结核分枝杆菌有扩增条带出现，可将结核分枝杆菌与结核分枝杆菌复合菌群的其它菌区别开，达到菌种鉴定目的。结论 应用16S～23SrDNA间隔区序列PCR和RFLP分析能将结核分枝杆菌复合菌群等几组...
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功能基因组学研究新方法——双色红外荧光检测技术
...00nm两张图。发生突变的泳道，在700nm的图上可以在野生型条带下方看到一个条带，同时在800nm的图上相同的泳道也会有一个条带，这两个条带就是CELI核酸酶的剪切产物，两个条带片断大小之和等于扩增片段的大小，从而很容易对...
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补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR条件优化
...L,循环次数在3045次之间均能扩增得到清晰均一的特异性条带;同时,引物退火温度在55.5℃69.6℃范围内均适用;优化后PCR体系能够检测的最低DNA浓度为1.41ng/μl,即模板DNA在反应体系中的总量为约2.82ng.结论已经建立的优化后的PCR基...
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分泌-排泄抗原在华支睾吸虫病血清学诊断中优于粗抗原
...原优于粗抗原。 华支睾吸虫的分泌-代谢抗原的抗原条带为7～8，12.5，17及26～28kDa，而粗抗原还可以观察到35，43，70kDa，其中7和8kDa是主要成分［5］，并分泌-排泄抗原已被证实为急性感染期的有效诊断抗原［6］。华支睾吸虫...
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酸性环境下唾液分泌型IgA对变形链球菌免疫反应的体外研究
...迹反应。结果①SIgA与自身菌株和标准菌株均有免疫印迹条带；②同一个体对不同基因型的变形链球菌菌株出现不同的免疫印迹条带；③酸休克后，没有新的特异性条带出现，但有某些印迹条带强度增强。可见变形链球菌在酸性...
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大疱性类天疱疮与某些神经系统疾病间发病机制的研究
...分BP合并ND组与单纯BP组患者可出现230000、180000或165000抗原条带。BP合并ND组10例患者血清可识别脑组织中抗原条带（83％）；单纯BP组患者中5例可识别脑组织中抗原条带（12％），单纯ND组患者中2例可识别脑组织中抗原条带（13％）...
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斑节对虾（竹节虾）
...水盐度差不超过5。第2造可于8月中旬放苗。 六、科学投饵 科学投饵就是要按照对虾生活、生长的生理需要进行投饵。投饵量过多，容易败坏水质，增加饵料成本。反之无法满足对虾的营养需要，影响对虾的正常生长。投...
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乙型肝炎表面抗原胶体金试剂的研制
...维素膜上的抗-HBs单克隆抗体作用，并在该处显示紫红色条带。其具体检测方法如下：首先将可拆微量反应板固定在塑料框架上，然后每孔加入待测血清200μl，最后将HBsAg胶体金试剂纸条插入血清内，置室温下10?min后在自然光下观...
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中国研究者探讨了体外培养人牙周膜成纤维细胞雌激素受体表达的实验
...有表达，ER-β表达强于ER-α。分别计算ER-α、ER-β对应蛋白条带灰度值与内参β-肌动蛋白条带灰度值的比值，得到A组细胞ER-α、ER-β相对灰度值的均值为（0．80±0．08）和（1．05±0．11），B组细胞则为（0．95±0．09）和（1．13±0．10...
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第五节 膜载体的酶免疫测定
...电泳区带）。第二阶段为电转移。将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素膜上，选用低电压（100V）和大电流（1～2A），通电45min转移即可完成。此分阶段分离的蛋白质条带肉眼仍不可见。第三阶段为酶免疫定位。将印有蛋...
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都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱差异性分析
...电泳分析，见都柏林念珠菌和白念珠菌各有5条固定阳性条带出现，两者之间阳性条带大小差异有统计学意义。微流DNA芯片显示都柏林念珠菌固定出现阳性条带大小依次为960、1177、1297、1495、1797bp；白念珠菌固定出现阳性条带大...
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RT-PCR法与血凝抑制法鉴定流感病毒的比较
...见4株毒株中仅B/京防/184/93（乙型）毒株扩增结果有263bp一条带;再将3株甲型毒株分别用4对引物Hl、H3、N1和N2进行RT-PCR，2株甲3型毒株有927bp一条带，而甲1型有613bp一条带。结果显示，各型别、亚型扩增的条带互不干扰（图1），说...
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中国先天性缺失牙患者PAX9基因的新突变
...PAX9基因进行研究。结合DNA序列分析方法，对发现异常SSCP条带的患者进行突变分析。结果2个少牙畸形家系(家系A和家系B)的先证者出现异常SSCP条带，家系A和家系B内患者均出现与各自先证者相同的异常SSCP条带。经过DNA序列分析，...
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特殊鼠类--小家鼠的防制
...点，各种毒鼠药的使用浓度应比杀灭褐家鼠要高，但每堆投饵量可减少一半。一般灭鼠药饵用0.5～1.0g，敌鼠钠盐等3～5g。诱饵以各种种子为佳，少用水份多的瓜果蔬菜。投饵应本着多堆少量的原则。堆间距离最好为2m，一般不要...
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幽门螺杆菌的SDSP-AGE及免疫印渍分析
...分析，发现在阳性血清的NC纸上，可出现三条抗原决定簇条带，其Mr分别为49000，59000和67000，与文献报道相似；加阴性血清的NC纸上，无任何条带出现。在国兔抗人Hp抗血清的NC纸上，用酶标猪抗兔IGG抗体分析，也出现了Mr67000的条...
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附录四 灭鼠
...投放：一般只限野鼠，适于鼠密度高，地广人稀之处；⑤条带投放：每隔一定距离在一条直线上投药，用于灭野鼠。 在家庭中灭鼠投饵可以采取晚上布放，白天收掉，以免误伤儿童及禽、兽；也可用毒饵盒的方法，毒饵盒可...
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抗子宫内膜抗体和子宫内膜异位症①
...常人及内异症患者血清EMAb。结果：正常人EMAg有2条蛋白质条带（48.0kD和大于97.4kD）；内异症患者则有3条蛋白质条带（46.0、54.0和大于97.4kD），前者仅1条蛋白质条带(大于97.4kD），后者则3条蛋白质条带可与EMAb特异反应，且两者在...
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经伴放线放线杆菌刺激后CXCR4和CCR5在巨噬细胞中的表达研究
...CCR5的相对量凝胶成像系统扫描各趋化因子受体的cDNA电泳条带，通过软件分析得出条带的强度与净面积;并计算各条带的辉度，条带辉度计算公式为:条带强度×条带净面积;CXCR4和CCR5的mRNA相对表达量的计算公式为:各趋化因子受体电...
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一个植物乳杆菌隐蔽质粒的测序和注释
...胞壁的肽聚糖层。使用华舜胶回收试剂盒分离纯化各质粒条带。1.3构建测序载体经预试验确定植物乳杆菌的该质粒具有一个EcoRⅠ酶切位点。对该质粒和载体质粒PUC18使用EcoRⅠ（farmentas,MBI）分别进行酶切，并将酶切产物用T4DNA连...