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siRNA的制备
...许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高，为一个基因合成3—4对siRNAs的成本就更高了，比较常见的做法是用其他方法筛...
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siRNAs在基因治疗中的应用
...用而创造出新的治疗性药物.小干扰RNAs(smallinterferingRNAs，siRNAs)最有可能成为这类药物中的新成员.本文将从siRNAs的沉默机制、基因沉默效率、表达载体，siRNAs在活体内的应用以及作为可能的治疗性药物等方面，探讨其应用于临床...
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siRNA治疗研究异彩纷呈（中）
...最具挑战性的障碍。动物实验采用的是无添加的剂型（裸siRNA）或作为共轭、脂质体/阳离子脂质体复合物或与肽、聚合物或抗体复合物的修饰小分子干扰核糖核酸（siRNA）。局部、直接运送siRNA在一些组织部位已经得到阐明，但si...
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siRNA实验成功要点
1.对每个基因设计并检测两到四个siRNA序列 为了找到潜在靶位点，扫描靶基因中的AA序列。记录每个AA3’端19个核苷酸作为潜在siRNA靶位点。潜在靶位点需通过GENBANK数据库的BLAST分析，去除那些与其它基因明显同源的靶位点。...
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用RNaseIII消化长片断双链RNA制备siRNA库
其他制备siRNA的方法都需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个最有效的siRNA。而用RNaseIII降解长片断双链RNA成为siRNAs库就象制备一份混合有各种siRNAs“混合鸡尾酒”，RNaseIII的完全降解产物（12—15bp）同样可以诱导专一的基因...
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RNA干扰技术在哺乳动物中的应用
...细胞中,RNAi由21～23个核苷酸组成的双链RNA引发.小干扰RNA(siRNA)可以在体外合成或通过表达载体在哺乳动物细胞内合成.由于RNAi技术具有快速、简单和特异性强等特点,在基因功能研究、抗病毒治疗和抗肿瘤治疗等方面有广泛的应用...
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新型siRNA候选药物显示强烈免疫应答
遗传物质合成的小片段——小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)可以阻断异常蛋白的产生，然而siRNA候选药物能同时诱发机体产生强烈的免疫反应，造成毒副作用。2009年第2期Oligonucleotides上的一篇综述文章就siRNA如何激活免疫反应，如...
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《自然》子刊：辨别力高的siRNA
...基因的相似变异体的高度特异性的小干扰RNAs。小干扰RNAs(siRNAs)是一些能够减少目标mRNAs表达的微小RNAs。近年来，生物学家已经把siRNAs作为一种重要的工具。siRNAs也具有临床治疗的潜在意义，它可以作为药物用于减少致病突变基...
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siRNA研究新进展
...日在线版）上有篇小RNA研究内容颇为引人注目，提出次级siRNAs（secondarysiRNAs，又称传递RNAi）是一种特殊的小RNAs群体。来自荷兰皇家科学院（HubrechtLaboratory，NIOB-KNAW）的研究人员从可以表达一个单22核苷酸的初级siRNA（primarysiRNA）...
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siRNA治疗研究异彩纷呈
...实际应用，则还需要克服现实中的种种困难。 ■siRNAs治疗被看好 RNAi途径是通过小RNAs，包括小的干扰性RNA（siRNAs）和微小干扰RNA（miRNAs）引导的。基因沉默可以由siRNA通过信使RNA（mRNA）顺序特异性分裂诱导，而miRNAs...
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新型siRNAs能够区分基因变异体
...使得它能够区分出同一基因的相似变异体。小型干扰RNAs(siRNAs)是那些能够减少目标mRNAs表达的小型RNAs。近来，生物学家已经把siRNAs作为一种重要的工具投入到应用中。siRNAs也具有临床治疗的潜在意义，它可以作为治疗剂用于减少...
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抗击肿瘤和病毒的新策略
...和病毒感染。”他说：“我们通过合成小的干扰RNA（siRNA），可以用来开发药物治疗病毒感染和癌症。现在我们研究的更加深入，已经知道对不同的细胞培养物要合成不同的siRNA来治疗不同的疾病。”先前的研究显示siRNA...
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四川大学最新文章发表siRNA新方法
...duBiologicalProducts）的研究人员通过构建质粒pAd-hTR证明了hTRsiRNA在HeLa细胞系中有效和特异的端粒酶的敲除，从而指出了这种siRNA表达重组腺病毒系统在癌症基因治疗方面的前景。这一研究成果公布在《CancerGeneTherapy》杂志上。领导...
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Nature子刊破解siRNAs技术难题
由于短干扰RNA（ShortinterferingRNAs，siRNAs）具有沉默致病基因的潜力，其成为了目前许多研究的主题。然而，要有效地发挥治疗效应，必须首先让细胞摄取siRNAs，使其进入到细胞溶质（cytosol）中——这对于研究人员而言是一个重大...
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hTERT-siRNA及hTR-siRNA的合成及对Hut78细胞端粒酶活性的影响
...成端粒酶逆转录酶(hTERT)基因及端粒酶RNA(hTR)的小干扰RNA(siRNA)对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株Hut78端粒酶活性的影响，研究者采用体外转录法分别合成两条hTERT-siRNA及hTR-siRNA。采用siRNA直接处理细胞裂解液及磷酸钙共沉淀法将siRNA转...
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RNA干扰技术在抗病毒性疾病中的应用
...先在Dicer酶的降解下形成21～23核苷酸长度的小干扰RNAs（siRNAs），每个siRNA的3‘端都有2个碱基突出。在RNAi效应阶段，siRNA结合到核糖核苷酸酶复合物上形成RNA诱导的基因沉默复合体（RNA-inducedsilencingcomplex，RISC）。该复合体依赖ATP...
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siRNA的转染
将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并...
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RNAi技术突破：siRNA体内传递机制
...递进脊椎动物的时候出现了许多问题。尤其是小RNAs，即siRNAs（smallinterferingRNAs），在动物操作中十分困难。虽然利用不同的方法，比如高压喷射（high-pressureinjections）或者胆固醇协力，可能可以成功传递siRNAs，但是其机制至今并...
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化学合成siRNA
在较早的哺乳动物RNAi实验中，siRNAs是通过化学方法合成的，就像合成引物一样，是应用起来最方便的一种方法，研究人员几乎不需要做什么工作。但是RNA合成成本高，定制周期长，特别是有特殊需求的RNA序列。由于价格比其他...
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过程工程所构建小核酸药物输递系统
...核酸药物对肿瘤具有很好的治疗作用，但是小核酸药物（siRNA）由21-25个核苷酸组成，其电荷密度较低，且为刚性骨架，使其包载率较低；要提高小核酸药物的包载率，将使用大量带正电的材料，其对机体会产生明显的毒副作用...
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体外转录合成siRNAs
体外转录合成siRNAs，其成本相对化学合成法比较低，是一种相对性价比高的筛选siRNAs的好方法，而且要比化学合成法更快的得到siRNAs。一旦得到DNA双链模版（这个还是需要DNA合成的，不过DNA合成的成本就比较低了），只要24小时...
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针对Bcl-2的siRNAs可以抑制胰腺癌生长
...国的一项研究结果显示：针对bcl-2基因设计的小干扰RNAs（SiRNA）可有效抑制胰腺癌的生长。结果发表在9月份的《Gut》（Gut2005;54:1215-1216,1298-1308）杂志上。Bcl-2是一种抗凋亡基因，在大多数前列腺癌中过表达，已经由研究结果显示...
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RNAi技术在医学上的应用研究进展
...的mRNA降解，达到阻止基因表达的目的［1］。人工合成的siRNA（smallinterferingRNA，小分子的干涉RNA）是长度为21～25个核苷酸大小的小RNA分子，它可以与RISC共同发挥作用，使沉默复合物识别靶目标。目前研究表明，在许多生物体中...
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Bioneer确保第二代癌症遗传子治疗剂的本原高新技术
...已经结束的知识经济部所试行的‘利用目标定向传达体的siRNA开发癌症遗传子治疗剂‘课题的第一阶段，并签署了第二阶段的协议。Bioneer在第二阶段事业中，通过siRNA的大量生产，为了全临床选定了新药候补物质。为确保目标定...
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留美博士研究siRNA可防治非典
...最新研究成果：中美研究人员发现两种小型干扰核糖核酸siRNA，可以降低猴子体内的非典病毒含量并预防再次感染。 猴子实验 研究小组在实验对比中，共使用5组猴子，每组4只，所选猴子全部为短尾猿。其中两组猴子不接受...
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中国首个siRNA高通量筛查中心即将建立
...iochip公司(SBC)作为首要合作伙伴，为SBC提供各种小干扰RNA(siRNA)库。SBC将使用此siRNA库建立中国首个siRNA高通量筛查中心。siRNAs是合成RNA分子，具有通过调节蛋白形成而“开放”和“关闭”基因的能力（即RNA干扰RNAi)。siRNAs用于功能...
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siRNA表达载体
多数的siRNA表达载体依赖RNA聚合酶III启动子(polIII)中的一种，操纵一段45—50nt的发夹结构RNA（smallhairpinRNA,shRNA）在哺乳动物细胞中的表达,shRNA在细胞内会自动被加工成为siRNA，从而引发基因沉默或者表达抑制。这一类启动子包括大...
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RNA干扰靶向抑制胃癌SGC7901细胞COX2基因和蛋白表达的研究
...和转移提供基因治疗的新方法。方法设计并合成6条COX2siRNA和1条阴性对照siRNA，用3种不同的转染试剂分别转染胃癌SGC7901细胞，荧光定量PCR和Westernblotting检测胃癌SGC7901细胞中COX2基因和蛋白的表达。结果TOPtranfection能够有效介...
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脯氨酸羟化酶2siRNA对抗霉素诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响
...l.22No.11P.673-67615（西安）为了探讨是否脯氨酸羟化酶2(PHD2)siRNA通过减少缺氧诱导因子(HIF)1的降解而减轻缺氧引起的肾小管上皮细胞凋亡。研究者构建针对人PHD2的表达质粒，将其转染到培养的人肾小管上皮细胞系(HKC)中。用RT-PCR方...
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将siRNA传递到中枢神经系统
...ly制药公司和Hanyang大学的研究人员发表的最新文章证实，siRNA（小干扰RNA）能够通过血脑障壁到达中枢神经系统。在神经疾病治疗过程中的一个主要障碍是血脑障壁的存在，这道屏障使治疗性分子无法从血液进入大脑。在这项新...