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等电聚焦(isoelectricfocusing,IEF)电泳技术
...IEF)是60年代中期问世的一种利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率可达0.01pH单位,因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。 ⒈IEF的基本原理在IEF的电泳中,具有pH梯度的...
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等电聚焦
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是...
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第四节 蛋白质的理化性质
...合物,其理化性质一部分与氨基酸相似,如两性电离、等电点、呈色反应、成盐反应等,也有一部分又不同于氨基酸,如高分子量、胶体性、变性等。 一、蛋白质的胶体性质 蛋白质分子量颇大,介于一万到百万之间,故...
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穴位经皮电刺激对弱视小儿立体视锐有影响
《中华中医药杂志》2008年第1期中国研究者观察穴位经皮电刺激对小儿弱视远近视力和立体视锐的影响。研究者选取小儿弱视患者70例,共80只患眼随机分为穴位经皮电刺激组和西医常规治疗组,观察治疗前后两组远近视力和立体...
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两种凝血酶原提取方法的比较
【摘要】目的比较等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原的纯度。方法分别采用等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原,凝血酶原经单独钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质...
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穴位经皮电刺激对弱视小儿立体视锐有影响
《中华中医药杂志》2008年第1期中国研究者观察穴位经皮电刺激对小儿弱视远近视力和立体视锐的影响。研究者选取小儿弱视患者70例,共80只患眼随机分为穴位经皮电刺激组和西医常规治疗组,观察治疗前后两组远近视力和立体...
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生化实验讲义(理论部分)四--电泳技术(二)
...约需2小时。4.10等电聚焦等电聚焦电泳是根据两性物质等电点(pI)的不同而进行分离的,它具有很高的分辨率,可以分辨出等电点相差0.01的蛋白质,是分离两性物质如蛋白质的一种理想方法。等电聚焦的分离原理是在凝胶中通...
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常见蛋白质的等电点
常见蛋白质等电点参考值蛋白质等电点鲑精蛋白[salmine]12.1鲱精蛋白[clupeine]12.1鲟精蛋白[sturline]11.71胸腺组蛋白[thymohistone]10.8珠蛋白(人)[globin(human)]7.5卵白蛋白[ovalbuin]4.71;4.59伴清蛋白[conalbumin]6.8,7.1血清白蛋白[serumalbumin]4.7-4...
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第二节 电泳技术的应用
...白质在电场中不再移动,溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点(isoelctricpoint,pI)。若溶液pH处于等电点酸侧,即pH<pl,则蛋白质带正电荷,在电场中向负极移动。若溶液pH处于等电点碱侧,即pH>pl,则蛋白质带负电荷,向正极...
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经皮电神经刺激穴位治疗对脑卒中患者偏瘫侧上肢体感诱发电位的影响
...ber.com)4月10日消息,该项研究目的是比较单次(45min)经皮电神经刺激(TENS)穴位治疗对脑卒中患者偏瘫侧上肢体感诱发电位(SEP)的影响。方法采用符合入选条件并签署知情同意书的29例初发脑卒中患者分层后随机分为治疗组...
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腹针经皮电刺激对颈肩腰腿痛患者即时镇痛效应的观察
2008年04月29日中国针灸27(9):657医学空间(MEDcyber.com)4月29日消息--中国浙江的研究人员近期观察了经皮神经电刺激(TENS)结合腹针取穴治疗颈肩腰腿痛患者即时镇痛作用的临床疗效。将120例颈肩腰腿痛患者随机分为腹针TENS组...
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户尘螨过敏原双向免疫印迹指纹图谱研究
...双向电泳及双向免疫印迹技术确定户尘螨过敏原。结果等电点和分子量分别为5.4,25.6KD的过敏原组分(以下表示方法相同)对应于Derp1;7.6~9.0,15.2KD对应于Derp2;8.1~8.5,28.5~28.6KD对应于Derp3;6.5~7.0,61.0~62.0KD对应于Derp4;7.0~7.3...
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第十七章 血清载脂蛋白分离纯化及其鉴定--第一节 载脂蛋白分离纯化
...聚焦分离法 等电聚焦(lsoelectrofocusing,IEF)又称为等电点分离法,是利用一种含载体两性电解质(carrierampholyte)的凝胶在电场中形成pH梯度,同时把具有两性电解质性质的样品(如蛋白质)聚集在他们的等电点相应的pH区带中...
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高效毛细管电泳分离模式
...高效毛细管电泳的应用范围;四,毛细管等电聚焦1.根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技术;2.毛细管内充有两性电解质(合成的具有不同等电点范围的脂肪族多胺基多羧酸混合物),当施加直流电压(6~8V)时,管内将建立一...
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肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药表型和基因型研究*
...ESBLs菌株表型鉴定、PCR检测基因型、等电聚焦电泳鉴定等电点,并对这些菌株耐药的特性和基因型进行了探讨。结果ESBLs的检出率为18.6%,其中大肠埃希菌的检出率为27.7%,肺炎克雷伯杆菌的检出率为8.57%。引起耐药的基因型主要...
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层析技术(Layer-analisetechnique)
...电荷蛋白质阳离子进行交换。 溶液的pH值与蛋白质等电点相同时,静电荷为0,当溶液pH值大于蛋白质等电点时,则羧基游离,蛋白质带负电荷。反之,溶液的pH值小于蛋白质等电点时,则氨基电离,蛋白质带正电荷。溶液的pH...
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多媒体生物反馈治疗广泛性焦虑的临床疗效分析
...oGraph多媒体生物反馈系统,电极包括脑电、心电、肌电、皮电和皮温等。实施步骤:治疗师在疗前向病人讲解治疗原理和方法,制定反馈计划,安置电极,指导训练,每次结束时与病人一起总结评价。1~3天1次,每次30分钟左右,...
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多媒体生物反馈治疗广泛性焦虑的临床疗效分析
...oGraph多媒体生物反馈系统,电极包括脑电、心电、肌电、皮电和皮温等。实施步骤:治疗师在疗前向病人讲解治疗原理和方法,制定反馈计划,安置电极,指导训练,每次结束时与病人一起总结评价。1~3天1次,每次30分钟左右,...
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双向电泳在大鼠脊髓蛋白质组分析中的应用
...的首选技术之一。所谓双向电泳,第一向根据蛋白质的等电点不同,分离蛋白质;第二向将等电点相同的蛋白质,根据分子量不同再次得到分离。与通常的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相比,能获得更多的信息。1双向电泳中蛋...
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自身抗原52kD-Ro/SSA的序列分析及抗原性预测
...计算机分析 将52kD-Ro/SSA序列输入计算机,分析蛋白质等电点曲线,用Kyte-Doolittle氨基酸亲水标准及7个残基一组的预测方案作亲水性分析[1]。用Emini方法预测表面可及性,用Karplus-Schulz标准分析肽链柔性。用Chou-Fasman(CF)和Garnier-...
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蛋白质提取与纯化技术
...的pH值和盐浓度的选择。1、pH值 蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内。用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象的...
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蛋白质提取与纯化技术简介
...值和盐浓度的选择。 1、pH值 蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内。用稀酸或稀碱提取时,应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离基团发生变化,从而导致蛋白质构象...
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常用的层析分析方法
... 2.蛋白质的行为 蛋白质所带电荷取决于它的等电点(PI)和层析柱中的PH值。当柱中的PH低于蛋白质的PI时,蛋白质带正电荷,且不与阴离于交换剂结合。而随着洗脱剂向前移动,固定相中的PH值是随着淋洗时间延长而变...
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等电聚焦电泳技术
(一)原理等电聚焦技术是一种根据样品的等电点不同而使它们在pH梯度中相互分离的一种电泳技术。本法的分辩率极高,所以在进行等电聚焦电泳时,要求样品不能过于复杂,一般应经其他方法(如层析法)提纯后再进行等点...
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第三节 影响抗原抗体反应的因素
...蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH为6~8进行。PH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质,例如pH达到或接近抗原的等电点时,即使无相应抗体存在,也会引起颗粒性抗原非...
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第三节 氨基酸
...-氨基酸,其水溶液中两性离子都占绝对多数。 2.等电点 若将氨基酸的水溶液酸化,则两性离子与H+结合而成阳离子,若加碱于氨基酸的水溶液中,则两性离子中氮原子上的一个氢离子与OH-结合成水,而两性离子变成阴...
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IL-6D24-Linker-PE40重组毒素的分子生物学特性预测
...的某些分子生物学特性,诸如柔性、抗原性、亲水性、等电点及表位,以预测融合蛋白及其接头设计的合理性。 1 材料与方法 1.1 融合蛋白分子生物学特性的计算机预测 采用军事医学科学院吴加金教授设计的GOLDKEY软...
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幽门螺杆菌CagA蛋白的纯化与鉴定
...凝胶等电聚焦电泳结果显示,该Mr为130×103纯化蛋白的等电点(pI)为8.1。 图2 纯化蛋白SDS-PAGE分析 Fig2.SDS-PAGEanalysisofpurifiedH.pyloriprotein Theseparatinggelcontained10%acrylamide Lane1:guanidineextract,lane2:fractionAofgelfiltrationchromato...
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生物大分子样品的保存
...结晶等。③以电荷差异为依据的方法:电泳、电渗析、等电点沉淀、吸附层析和离子交换层析等。④以生物学功能专一性为依据的方法:亲和层析等。表2-2各种主要分离纯化方法的比较:方法原理优点缺点应用范围沉淀法蛋白质...
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第一节 抗原的制备
...质易溶于极性溶剂,非极性物质易溶于非极性大分子的等电点远的pH值使溶解度增加。因此,在不同的抗原提取过程中,所选用的溶剂的性质、pH值、离子强度、抽提温度、介电常数等因素是提取成败的重要因素。要达到分离提...