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Nature：LINE-1逆转录转座事件的作用
LINE-1(longinterspersedelement-1)逆转录转座子在试管中和在小鼠脑中已知能够穿过成年大鼠神经前体细胞（NPCs）的基因组。现在，研究表明，从人胎儿脑中分离出的以及从人胚胎干细胞演变来的NPCs，在试管中还支持人工培养的人LINE-1s...
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逆转录转座子在肿瘤发生中的重要作用
6月28日，Science杂志在线报道了关于体细胞逆转录转座子在人类肿瘤发生中作用的最新研究进展。转座子（TEs）在人类基因组中含量丰富，有些能够通过RNA中间体产生新的插入序列。在癌症细胞中，通常抑制TE活动的机制如果遭到...
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应用循环逆转录PCR技术检测丙型肝炎病毒RNA
摘要：循环逆转录（circulatoryreversetranscription，CRT）是线性增长逆转录cDNA产量的一种新技术。为了将该技术用于检测HCVRNA，通过改变CRT的循环次数，结合竞争PCR，作出标准曲线。采用16次CRT加34次循环PCR检测了136例HCVELISA阳性、54...
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人类基因组中发现非逆转录RNA病毒
...色体，将会随生殖细胞传递到子代个体中。到目前为止，逆转录病毒是唯一已知可在脊椎动物中内生化的病毒。但据最新的这项研究发现，非逆转录病毒博尔纳病毒也可在进化过程中内生化到哺乳动物基因组中。博尔纳病毒(BDV)...
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新基因的发现或有助于治疗阿尔茨海默氏症
...产生和T蛋白磷酸化。 研究小组还发现，Rps23r1是通过逆转录转座过程被创造出来的。基因通过信使核糖核酸（mRNA）逆转录进行复制，而所得基因副本会被放置在细胞DNA的不同位置。虽然大多数逆转录转座事件都导致非功能性...
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应用逆转录-聚合酶链反应检测乙型肝炎患者血清中的HDVRNA
...、肝炎慢性化。甚至发展为肝硬变的因素之一。我们采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对各型乙型肝炎患者进行了血清HDVRNA的检测。108份血清采自石家庄市第五医院1994年10月～1995年12月住院患者，均有一项以上HBV血清标志物阳性。...
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科学家能让干细胞衰老变缓慢
...，成熟干细胞出现的大多数DNA损伤和染色质改变原因在于逆转录转座子。”乔治亚理工学院生物学校副教授金#8226;佐顿说。“逆转录转座子过去被认为没有什么功能，甚至被标上‘垃圾DNA’的标签。但累积证据表明，这些成分在...
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BPDE诱发16HBE恶性转化过程中eIF3p36的表达变化
...gT-TAMARA-3’，扩增产物cDNA长度为65bp。 1.2.2eIF3p36mRNA逆转录合成cDNA采用中山达安基因公司自制逆转录试剂盒,在PE9600PCR仪按下列条件进行逆转录，反应条件为37℃1h,95℃3min,逆转录合成cDNA。反应总体积为20μl。 1.3Taqman荧...
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iPSC基因组稳定性良好
...干细胞的基因组测序，发现重编程过程不会增加DNA重排或逆转录因子转座的风险。该研究成果发表于10月4日的《细胞—干细胞》（CellStemCell）杂志上。诱导多功能干细胞（iPSC）绕开了胚胎干细胞研究面临的伦理和法律等障碍，...
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PCR和RT-PCR技术
...更易于操作。RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶，以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物（GSP）起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在最佳条件下进行...
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表达人自身抗原SSA/Ro60重组体的构建及鉴定
...自身免疫病中的抗原抗体作用提供物质基础。方法：采用逆转录-PCR技术克隆自身抗原SSA/Ro60cDNA，定向插入表达载体PGEX-2T，并经酶切电泳，DNA测序鉴定分析。结果：经鉴定，证明成功构建了表达人自身抗原SSA/Ro60的重组体。结论...
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应用GelWorks软件定量分析PCR扩增产物
...产物的定性与定量分析。方法提取孕妇全血mRNA，经体外逆转录后，应用ε/γ引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段，同时用不同剂量标准mRNA经逆转录及PCR扩增后，经琼脂糖凝胶电泳，以凝胶成像系统扫描成像，用GelWorks1D软件...
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我国掌握蓝舌病病毒检测技术
...野战输血研究所成功研制的两个蓝舌病病毒检测试剂盒（逆转录—聚合酶链式反应核酸通用检测试剂盒和荧光定量逆转录—聚合酶链式反应核酸通用检测试剂盒），经农业部批准进入临床试验。临床试验完成后，将按国家有关要...
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豚鼠哮喘模型和哮喘患者气管上皮细胞内皮素-1和内皮素转化酶mRNA表达
【摘要】目的通过逆转录-DNA聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测豚鼠哮喘模型气管上皮内皮素-1（ET-1）mRˉNA表达，检测哮喘患者气管上皮内皮素-1（ET-1）和内皮素转换酶（ECE）mRNA表达。方法（1）动物实验部分:Hartley株豚鼠用卵蛋白...
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胰腺癌p16基因mRNA异常表达的研究
我们应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰腺癌中p16基因mRNA的表达情况，同时应用聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)对其异常表达的原因进行分析，现将结果报道如下。 一、材料和方法 1.对象：新鲜胰腺癌...
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法专家首次揭示艾滋病毒侵入细胞核全过程
...连成一体后，艾滋病病毒便可以繁殖。艾滋病病毒是一种逆转录病毒。在感染受害细胞时，这类病毒首先将其RNA（核糖核酸）逆转录为DNA（脱氧核糖核酸），然后将这段逆转录的基因插入细胞基因中，由细胞的转录机构转换为病...
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喉癌组织中表皮生长因子受体mRNA含量测定
...外科杂志2006Vol.41No.10P.777-78122（杭州）为了建立TagMan探针逆转录-实时荧光定量PCR技术测定喉癌组织中表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)mRNA水平的方法，分析其应用价值。研究者设计高特异性引物和探针，以TagMan探针...
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肾癌乙酰肝素酶基因和蛋白表达的研究
...及其与肾癌发生、发展和转移的关系。方法应用荧光定量逆转录聚合酶链式反应和免疫组化Envision二步法分别检测30例新鲜肾癌和癌旁正常组织中乙酰肝素酶mRNA的表达水平及62例石蜡包埋肾癌组织中乙酰肝素酶蛋白的表达水平。...
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梭菌基因删除新策略
...II型内含子可高效插入梭菌基因组的启发，设计了一个将逆转录转座与同源重组结合起来的基因删除策略。这一策略的第一步是在II型内含子的下游引入与拟删除基因上游同源的一段序列（简称为同源序列）；第二步是通过逆转...
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HIV/HCV共患病患是否可以采用抗病毒疗法？
...患HIV且同时感染丙型肝炎病毒（HCV）的患者在使用抗病毒逆转录疗法时不仅抑制HIV，还减少了HCV的复制。美国辛辛那提大学研究人员7月23日刊载在ScienceTranslationalMedicine期刊上的研究报道表示，罹患HIV且同时感染丙型肝炎病毒（HC...
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Nature子刊：于晓方课题组揭示蛋白活化机制
...抗例如HIV和SIV等反转录病毒。其具有的dNTPase活性与这一逆转录病毒限制功能有关。SAMHD1可通过耗尽dNTP水平抑制不分裂骨髓细胞和静息CD4+细胞中的反转录病毒。这标志着病毒学特别是HIV领域又一轮研究热潮的开始。今年9月，于...
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动物所在基因起源和丢失研究中取得新进展
...起源之后其外显子/内含子结构往往发生快速的演化。RNA逆转录可产生新的复制基因，而这些新基因不含有内含子，因此是研究内含子起源机制的良好体系。中国科学院动物研究所张勇课题组总结比较了若干母基因和子基因的结...
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小鼠白细胞介素-18的cDNA克隆及在真核细胞中初步表达的研究
...一医院感染疾病科，北京100034）关键词：白细胞介素-18；逆转录多聚酶链反应；cDNA；基因克隆化；基因表达 摘 要 目的： 克隆小鼠白细胞介素-18(IL-18)编码区的cDNA，并实现在真核细胞中的表达。方法：用小鼠白细胞介素...
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法科学家首次拍摄艾滋病病毒侵入细胞核全过程
...一体后，艾滋病病毒便可以繁殖。 艾滋病病毒是一种逆转录病毒。在感染受害细胞时，这类病毒首先将其ＲＮＡ（核糖核酸）逆转录为ＤＮＡ（脱氧核糖核酸），然后将这段逆转录的基因插入细胞基因中，由细胞的转录机构...
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iPS中多能标记物的表达顺序
...能通过转录因子（transcriptionfactor）Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc的逆转录转导（retroviraltransduction）来实现多能性的诱导。在2008年2月7日出版的《细胞—干细胞》（CellStemCell）上，来自美国的一组科学家发明了一种新技术，使得以上四种...
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乙型脑炎病毒TaqMan逆转录聚合酶链反应检测方法的建立
【摘要】目的采用TaqMan技术，研究建立实时荧光逆转录聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测乙型脑炎病毒（Japaneseencephalitis,JEV）的效果。方法根据JEV非结构蛋白基因NS3基因序列（GenBank序列号,U15763），结合生物学软件序列比对分析，...
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HCN4基因在风心二狭心房纤颤患者心房组织中mRNA表达初探*
...础。方法取手术患者心耳组织100mg，提取RNA后应用半定量逆转录－PCR方法检测mRNA含量，并对PCR产物测序分析。以HCN4基因mRNA和内参β-actin含量的比值作为评价HCN4基因mRNA表达水平指标。结果测定HCN4基因cDNA序列同源性为100%。试验组...
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胸腺素beta4在快速老化鼠耳蜗的过度表达
...荧光显色，并使用微机对其图像进行分析。通过实时定量逆转录聚合酶链式反应技术对其结果进行验证。用免疫荧光染色的方法，确定候选基因所编码的蛋白在耳蜗中的表达部位。结果多数基因在老年耳蜗中的表达并没有明显的...
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应用干扰RNA体外抑制严重急性呼吸综合征冠状病毒N基因的表达
...GFP表达的强弱，采用WesternBlot分别检测GFP与N蛋白的表达，逆转录PCR检测N基因的mRNA。结果pshRNA-N作用组绿色荧光强度明显弱于未干扰组，WesternBlot和逆转录PCR结果也证实pshRNA-N对N基因和N蛋白的表达有明显抑制作用，而无关序列的sh...
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德国制定修复性基因治疗新标准
...止基因治疗的试验，因为专家认为这个孩子的白血病是由逆转录基因传病媒介激发的。当一项动物实验也出现类似的结果时，德国当局决定暂时终止一系列的试验。德国医生协会和审批基因治疗的ＰａｕｌＥｈｒｌｉｃｈ研究所...