衣原體檢查法

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。

1 拼音

yī yuán tǐ jiǎn chá fǎ

4 禁忌

無特殊禁忌

5 準備

採集待檢的標本

6 方法

6.1 1.直接塗片染色法

(1)用滅菌生理鹽水洗淨尿道口。戴消毒手套後,用手指由陰莖根部向尿道口方向擠出膿液,用接種環或棉拭子蘸取膿液,輕輕塗於載玻片上。

(2)標本塗片,自然乾燥甲醛固定10~15min。

(3)當日配製的姬姆薩溶液染色1h。

(4)再用95%乙醇溶液淋洗塗片,乾燥

(5)油鏡下陽性標本中可在上皮細胞內找到1~3個或更多呈藍色、深藍色或暗紫色的包涵體

6.2 2.衣原體抗原檢測

(1)取材。

①男性患者尿道取材時,可用細小棉拭子伸入尿道2~4cm,輕輕轉動後取出分泌物(應略帶黏膜)。

②女性患者取材時,先用陰道窺器暴露宮頸口,用無菌棉拭子拭去宮頸口表面的分泌物,另取一棉拭子插入宮頸口內1~2cm,轉動並停留10~20s取出。

直腸取材時,應將棉拭子插入肛門2~3cm。

檢查衣原體咽炎時,應從扁桃體扁桃體窩取材。

⑤對青春期前女童可採集陰道處分泌物標本

(2)用商品試劑盒檢測檢測前先將試劑盒和測試卡等室溫下復溫30min。

(3)加試劑至塑料管刻度處(約0.6ml),將拭子標本浸入管內搖勻,置80℃水浴,10~20min取出,轉動拭子並沿管壁擠壓,棄去拭子,提取液置室溫冷卻後蓋上管蓋。

(4)將測試卡置檯面,加入5滴提取液於檢體窗,靜置30min後觀察結果。

(5)質控窗和結果窗均顯示一條藍帶爲陽性,結果窗無變化爲陰性

6.3 3.免疫熒光

(1)將標本塗於玻片凹孔中或圓圈中,自然乾燥丙酮或無水甲醛固定5min,漂洗,再乾燥

(2)加30μl熒光素標記的沙眼衣原衣原體單克隆抗體試劑覆蓋凹孔,玻片置溼盒中或37℃下作用15min,去掉多餘試劑,用蒸餾水淋洗塗片,自然乾燥,加一滴封固液,蓋上蓋玻片,置熒光顯微鏡檢查

(3)陽性標本在高倍鏡下可見上皮細胞內的衣原體顆粒,爲單一、針尖大小、明亮的綠色熒光,在油鏡下爲熒光均勻、邊緣光滑的圓盤樣結構,也可見網狀體等其他形態衣原體顆粒。

7 注意事項

1.分泌物塗片時不要用力塗擦,塗片厚薄要合適。

2.女性宮頸分泌物、咽和直腸標本在塗片中由於雜菌較多,故推薦用培養法。

3.分離培養取材時拭子伸入尿道或宮頸的深度一定要足夠。

4.培養時,取材後應立即接種,標本離體的時間越短越好。

5.分離培養應採用加抗生素的選擇性培養基

6.氧化酶試劑應爲新鮮配製(現用現配),在棕色瓶中避光保存

7.氧化酶試劑遇鐵也會變紅,故接種環應非鐵絲所制。

8.對症狀不典型的男性患者取材,最好在其晨起排尿前或排尿4h以後。

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