5 準備
採集待檢的標本。
6 方法
6.1 1.直接塗片染色法
(1)用滅菌生理鹽水洗淨尿道口。戴消毒手套後,用手指由陰莖根部向尿道口方向擠出膿液,用接種環或棉拭子蘸取膿液,輕輕塗於載玻片上。
(3)當日配製的姬姆薩溶液染色1h。
(5)油鏡下陽性標本中可在上皮細胞內找到1~3個或更多呈藍色、深藍色或暗紫色的包涵體。
6.2 2.衣原體抗原檢測法
(1)取材。
①男性患者從尿道取材時,可用細小棉拭子伸入尿道2~4cm,輕輕轉動後取出分泌物(應略帶黏膜)。
②女性患者取材時,先用陰道窺器暴露宮頸口,用無菌棉拭子拭去宮頸口表面的分泌物,另取一棉拭子插入宮頸口內1~2cm,轉動並停留10~20s取出。
(2)用商品試劑盒檢測,檢測前先將試劑盒和測試卡等室溫下復溫30min。
(3)加試劑至塑料管刻度處(約0.6ml),將拭子標本浸入管內搖勻,置80℃水浴,10~20min取出,轉動拭子並沿管壁擠壓,棄去拭子,提取液置室溫冷卻後蓋上管蓋。
(4)將測試卡置檯面,加入5滴提取液於檢體窗,靜置30min後觀察結果。
(5)質控窗和結果窗均顯示一條藍帶爲陽性,結果窗無變化爲陰性。
6.3 3.免疫熒光法
(1)將標本塗於玻片凹孔中或圓圈中,自然乾燥,丙酮或無水甲醛固定5min,漂洗,再乾燥。
(2)加30μl熒光素標記的沙眼衣原衣原體單克隆抗體試劑覆蓋凹孔,玻片置溼盒中或37℃下作用15min,去掉多餘試劑,用蒸餾水淋洗塗片,自然乾燥,加一滴封固液,蓋上蓋玻片,置熒光顯微鏡下檢查。
(3)陽性標本在高倍鏡下可見上皮細胞內的衣原體顆粒,爲單一、針尖大小、明亮的綠色熒光,在油鏡下爲熒光均勻、邊緣光滑的圓盤樣結構,也可見網狀體等其他形態的衣原體顆粒。