4 血清無機磷的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 血清無機磷的測定原理
以三氯醋酸沉澱蛋白,在無蛋白濾液中加入鉬酸銨試劑,與無機磷結合成磷鉬酸鹽複合物,再以硫酸亞鐵爲還原劑、還原成藍色化合物,進行比色測定。與同樣處理的標準進行比較求得血清中磷含量。反應式如下:
(NH4)6Mo7O24+3H2SO4→7H2MoO4+3(NH4)2SO4
12H2MoO4+H3PO4→12MoO3·H3PO4+12H2O
12MoO3·H3PO4+還原劑→鉬藍(MB)。
4.5 試劑
(1)三氯醋酸-硫酸亞鐵溶液:稱取硫脲10g硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O)10.6g和三氯醋酸100g,以去離子水溶解並稀釋至1L,置冰箱保存。
(2)鉬酸銨溶液:稱取鉬銨4.4g溶解於約40ml去離子水中,取濃硫酸9ml,滴加入約40ml去離子水中,將兩液合併,以去離子水稀釋至100ml。
(3)無機磷標準貯存液(32.29mmol/L):稱取無水磷酸二氫鉀(KH2PO4,AR)4.39g,用去離子水溶解後移入1L容量瓶中,並稀釋至刻度,再加入氯仿2ml防腐,置冰箱中保存。
(4)無機磷標準應用液(1.29mmol/L):取無機磷標準貯存液4ml加入100ml容量瓶中,以去離子水稀釋至刻度,加入1ml氯仿防腐,置冰箱中保存。
4.6 操作方法
取血清0.2ml,加入三氯醋酸-硫酸亞鐵液4.8ml,充分混勻,放置10min後,離心沉澱。無機磷標準也同樣處理,然後按表1操作。
混勻,放置15min,用波長640nm或紅色濾光板,光徑1.0cm比色,以空白管校正吸光度至0點,讀取各管吸光度。
4.7 正常值
臍 帶:1.2~2.6mmol/L (3.7~8.1mg/dl)
兒 童:1.45~2.10mmol/L (4.5~6.5mg/dl)
成 人:0.97~1.45mmol/L (3.0~4.5mg/dl)
>60 歲:男0.74~1.2mmol/L (2.3~3.7mg/dl)
女0.90~1.3mmol/L (2.8~4.1mg/dl)
4.8 化驗結果臨牀意義
(1)高血磷:
①分佈異常:重症溶血性疾病,橫紋肌溶解症(含腎損害)、腫瘤細胞的溶解(化療)給予diphosphonate(磷排泄被抑制)、甲狀腺功能亢進(與磷排泄抑制及骨吸收亢進有關)。
②腎排泄減退:腎功能不全(急性、慢性)、甲狀旁腺功能減退症、假性甲狀旁腺功能減退症、生長激素過剩。
(2)低血磷:
①分佈異常:呼吸性鹼中毒(無酵解亢進)或糖皮質激素的治療等。
②腸道吸收減少:飲食性、維生素D缺乏、吸收不良綜合徵、繼發性甲狀旁腺功能亢進(由腎喪失)、磷結合劑(口服Mg、Ca、Al)、腎上腺糖皮質激素、嘔吐、胃液吸引(代謝性鹼中毒)。
③由腎丟失:
A.腎小管損害:Fanconi綜合徵(腎病-糖尿性侏儒症伴低血磷性佝僂病)、腎移植後(含繼發性甲狀旁腺功能亢進症、腎上腺糖皮質激素過剩)維生素D抵抗症、骨軟化症、腫瘤性骨軟化症(腸管、腎小管磷輸送障礙、維生素D代謝異常),特發性高鈣尿症、尿路阻塞解除後、急性腎小管壞死恢復期。
B.代謝異常和藥物:PTH分泌過剩、糖尿(滲透性利尿、磷再吸收與結合)、乙酰唑胺、代謝性鹼中毒、代謝性酸中毒、呼吸性酸中毒、胰高血糖素過多、糖皮質類固醇過多、低鉀血癥、低鎂血癥等。
4.9 附註
(1)磷的測定標本應選用血清,如用血漿,每ml標本內草酸鹽含量不可多於2~3mg,過量的草酸鹽可使磷測定時不易顯色。
(2)血標本不能溶血,並於採取血後儘快分離血清,以免血細胞內磷酸酯水解而使無機磷增加。
(3)在血清中加入三氯醋酸-硫酸亞鐵溶液時速度要慢,邊加邊混使蛋白沉澱物呈細顆粒,如蛋白沉澱呈片狀,可將磷包裹在其中,使測定結果偏低。
(4)加入鉬酸鹽後應立即充分混合。檸檬酸鹽一旦同鉬酸鹽結合,就不再同磷結合。
(5)尿磷測定與血磷相同。可取24h混合酸性尿(鹼性尿磷酸鹽會沉澱析出,故應加酸防腐),稀釋100倍左右後測定。
4.10 相關疾病
甲狀旁腺功能減退症、假性甲狀旁腺功能減退症、呼吸性鹼中毒、代謝性鹼中毒、繼發性甲狀旁腺功能亢進症、代謝性酸中毒、呼吸性酸中毒、低鉀血癥、低鎂血癥