2 註解
雙元載體系統，包括兩個質粒，一個是帶有T-DNA的微型質粒（雙元Ti載體），一個是帶有Vir區的輔助質粒。根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)是一種革蘭氏陰性土壤細菌，能夠通過感染植物的傷口，將其Ti質粒上一段含有植物激素和冠癭鹼合成酶基因的DNA轉移並整合至植物受體的基因組中。Ti質粒中的2個獨立的區域決定DNA轉移及整合：T-DNA區(transferredDNA)和vir區(virlence region)。基於Ti質粒這個結構特點，1983年Hoekema等提出雙元載體策略：將去除致瘤基因的T-DNA區從Ti質粒中分離，放置在一個能在農桿菌和大腸桿菌中複製的穿梭質粒中。這個穿梭載體稱爲雙元Ti載體。vir區則存在於一個已經除去T-DNA的Ti質粒中，在農桿菌中作爲輔助質粒，通過反式激活使T-DNA轉移到植物細胞基因組中。由於雙元Ti載體的體積小而非常便於基因克隆操作，所以逐漸取代了其它形式的Ti載體，已成爲植物基因工程中最重要的植物轉化載體。