4 尿維生素B2的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 尿維生素B2的測定原理
核黃素在440~500nm波長激發下產生黃綠色熒光,在一定濃度時,其熒光強度與維生素B2濃度成正比。先利用硅鎂吸附劑使維生素B2吸附以除去雜質,洗脫液中維生素B2被純化後進行熒光分析。
4.5 試劑
(1)熒光素鈉溶液(50mg/L):稱取熒光素鈉50mg置於500ml容量瓶中,用水溶解並稀釋至刻度,混勻後吸出0.5ml,再用水稀釋成1000ml備用(置4℃可穩定2~3個月)。
(3)硅鎂型吸附劑(60~100目)。
(4)維生素B2貯存標準液(50mg/L):將維生素B2置於含有無水氯化鈣的乾燥器內。24h,準確稱50mg置1L容量瓶中,加水約500ml及冰乙酸1.2ml,於溫水浴中助溶,冷卻至室溫後稀釋成1000ml,盛棕色瓶中並保存於4℃冰箱中。
(5)維生素B2應用標準液(500μg/L):取維生素B2貯存標準液1.0ml,用0.01mol/L鹽酸稀釋成100ml,貯棕色瓶中,於40℃下可穩定3天。
4.6 操作方法
(1)收採24h尿液,用10%硫酸約20ml防腐並作保存劑,樣品需避光保存,操作時亦需注意避光。
(2)裝柱(柱同維生素B1測定):柱底用少量玻璃棉阻住後,柱內加入少量水,再加入硅鎂吸附劑至柱1/2高度以使流速約爲60滴/min爲宜。
(3)加樣:將尿5ml加入上述柱內,過柱後以熱蒸餾水20ml洗柱。作標準管及空白管:標準管取維生素B2應用標準液(500μg/L)1ml代替尿液並過柱。空白管則以熱蒸餾水20ml過柱。
(4)洗脫:將上述三柱插入10ml帶塞刻度試管中注明測定管(U)、標準管(S)及空白管(B)。各加洗脫試劑5ml,待全部流出後,再加水5ml,亦待全部流入試管中,各以水補足至10ml刻度,混勻。
(5)熒光測定:先以熒光素鈉溶液(500μg/L)校正熒光計,固定讀數在50~80間,用激發波長440~500hm和發射波長560nm檢測各管熒光強度。
4.7 正常值
熒光測定法:0.1~0.4mg/d。
4.8 化驗結果臨牀意義
(1)尿液中核黃素受飲食因素影響較大,一般膳食時,尿中排出量佔攝入量的10%~20%。
(2)評論核黃素營養狀況最好進行核黃素的飽和試驗。方法爲口服核黃素3~5mg,隨之測定24h尿中核黃素排出量。排出20%爲營養狀況正常,若低於20%可能有核黃素缺乏。
(3)近年來認爲測定紅細胞或全血中谷胱甘肽還原酶活性係數是評價核黃素營養狀況的適宜方法。
(4)降低:見於維生素B2缺乏、脣炎、舌炎、口角炎、皮膚溢脂、角膜血管化等。升高:見於維生素B2攝入過量。
4.9 附註
(1)收集24h尿液於棕色瓶內,瓶中預先加入10%硫酸20ml,以防維生素B2破壞。
(2)留尿前不宜過多服用維生素B2藥物和食用富含維生素B2的食物,如動物內臟(肝、腎、心)、乳類、蛋類等。