3 概述
CGRP是一個由37個氨基酸組成的神經肽,廣泛分佈於中樞和外周神經系統,在心血管系統主要存在於支配心血管感覺或自主神經末梢中,爲中樞和外周神經系統的重要遞質。其生物活性是通過與特異性受體結合後,激活腺苷酸環化酶使細胞內cAMP增高,經第二信使cAMP的中介而產生生物效應。具有很強的血管擴張、心肌正性變力與變時作用,參與血糖的調節並能抑制脂質過氧化,保護多種組織細胞。
4 腦脊液降鈣素基因相關肽的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 腦脊液降鈣素基因相關肽的測定原理
本實驗是一種系列競爭反應放射免疫分析法,病人樣本和抗降鈣素抗體首先要經過預先溫育,標記降鈣素和病人樣本中降鈣素同時競爭抗體位點。溫育一定時間後,用PEG第二抗體來獲得沉澱結合物。最後,抗體結合物沉澱後進行計數,則病人樣本的濃度從標準曲線上就能得到。
4.5 試劑
(1)降鈣素抗血清:一瓶(二瓶*)凍乾粉降鈣素抗血清。每瓶加10ml蒸餾水溶解,輕輕翻轉混勻。冷存:溶解後在2~8℃可穩定至少3天。
(2)[125I]降鈣素:一瓶(二瓶*)凍乾粉碘標記降鈣素。每瓶加10ml蒸餾水溶解,輕輕翻轉混勻。冷存:溶解後在2~8℃可穩定至少30天,或至瓶上所
標明的失效期。
(3)降鈣素標準品:六瓶標號A至F的凍乾粉標準品。提前至少30min重新溶解,零標準品A瓶加6.0ml蒸餾水,其餘標準品B至F瓶各加3.0ml蒸餾水。使用移液管並輕輕翻轉混勻。冷存:溶解後在2~8℃可穩定至少30天,凍存可延長標準品的有效期。如有必要,可分瓶避免反覆凍融。
每批標準品的降鈣素濃度大約爲0、30、100、300、600、和1200ng/L。準確濃度可參見瓶上的標籤。其它標準品點可通過以合適比例混合給出的標準品而得到(表1)。
(4)沉澱溶液:一瓶(二瓶*)沉澱溶液。內含驢抗羊丙球蛋白(DAGGG)和低濃度聚乙二醇。沉澱溶液以液體形式被提供、備用。冷存:開蓋後在2~8℃可穩定至少30天。在冷存後,可能形成細小的沉澱物,因而在使用前,應充分混勻沉澱溶液。
(5)降鈣素質控:二瓶,標號1和2。內含降降鈣素和蛋白基質溶液。提前至少30min,用移液管準確加入2.0ml蒸餾水溶解,輕輕地旋轉或翻轉混勻。冷存:溶解後在2~8℃可穩定至少30天。
*指200管KCLD2。
4.6 操作方法
使用放射免疫操作法。
4.7 正常值
45±9pg/ml。
4.8 化驗結果臨牀意義
CSF中CGRP的檢測有助於鑑別出血性與缺血性腦血管病,出血性腦血管明顯升高,而缺血性升高不明顯。
4.9 附註
採集CSF後,立即放在-70℃中保存。