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第二节 核酸分子杂交法
第二节 核酸分子杂交法 这是最早用于性病诊断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下（适宜的温度及离子强度等）可按碱基互补原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待...
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第三节 DNA的二级结构与功能
...构模型建立之前，早在1868年，Miescher已经从脓细胞提取到核酸与蛋白质的复合物，当时称为核素(nuclein)。但核酸在生命活动中的重要地位，却迟至本世纪50年代才被认识。 本世纪20年代，Levene研究了核酸的化学结构并提出四...
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突破性DNA单碱基突变检测技术
...着它非常适用于资源缺乏环境下的诊断应用。”DNA是一类核酸生物分子，它赋予了所有生物独特的遗传特征。在DNA双螺旋链中，一连串的碱基对编码着我们的遗传信息。随着基因组学研究的进展，人们清楚地了解到，仅一个碱基...
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2-2-6核酸的变性和复性
DNA的变性DNA的复性核酸分子杂交 变性（denaturation）和复性（renaturation）是双链核酸分子的二个重要物理特性。也是核酸研究中经常引用的术语。双链DNA，RNA双链区，DNA：RNA杂种双链（hybridduplex）以及其它异源双链核酸分子（...
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分子杂交技术
...的靶序列检测。 杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的，也可以在细胞内杂交,即细胞原位杂交。探针必须经过...
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深圳企业：率先找到埃博拉独特DNA片段
...几乎与确认病毒同步，深圳普瑞康就启动了“埃博拉病毒核酸检测试剂盒”的研发工作。从4月1日开始研发到11月底被批准上市，深圳普瑞康生物是如何在8个月的时间内完成埃博拉病毒检测试剂盒的研发、临床试验和产品注册申...
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第一章 基因诊断与性传播疾病--第一节 基因诊断的分子生物学基础
...，表现一定功能的基本单位。基因的物质基础是脱氧核糖核酸（DNA）（有些病毒的基因是核糖核酸，RNA）。原核细胞（如细菌和病毒）的基因单位较小，其排布一般是连续的。真核细胞的基因一般较大，其排布是不连续的，它被...
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第十九章 核酸（基因）分子探针--第一节 概述
第十九章 核酸（基因）分子探针第一节 概述 从化学和生物学的意义上理解，探针是一种已知特异性的分子，它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受...
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长春应化所在化学生物学生物分子识别领域取得可喜进展
...人计划”及国家基金委杰出青年基金等项目的支持下，在核酸序列特异性识别及构象功能转化开展了系列创新性的工作，取得了突破性进展。研究组关于纳米管与四链DNA作用的最新研究结果发表在国际权威期刊《美国科学院院刊...
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核酸杂交
核酸杂交是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开，而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双边结构。杂交通常在一支持膜...
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螺旋藻多糖对HSV-2糖蛋白gBmRNA表达的抑制作用
...的细胞数。阳性信号呈明亮的蓝紫色。 1.5统计学方法核酸杂交结果以(x±s)表示，多组数据比较采用方差分析。 2结果 光镜下观察原位杂交结果，可见表达HSV-2糖蛋白gB基因的Vero细胞被染成蓝紫色，染色部位位于细胞浆...
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第一节 原位杂交组织化学概述
第一节 原位杂交组织化学概述 一、核酸分子杂交技术 1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交...
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PCR和DNP标记核酸探针检测禽源沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的研究
PCR和DNP标记核酸探针检测禽源沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的研究(pdf)【摘要】目的观察利用PCR和DNP标记核酸探针检测禽源沙门氏菌四环素耐药性基因tetC。方法通过对临床分离并经生化实验和血清学试验鉴定的11株禽源沙门氏菌...
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第二十三章 基因诊断与基因治疗--第一节 基因诊断
...种方法可看作是有应用前景的基因诊断的方法。 1、核酸杂交：酸杂交是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开，而在条...
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第四节 非放射性标记的核酸探针
第四节 非放射性标记的核酸探针 放射性标记核酸探针在使用中的限制，促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展，在许多方面已代替放射性标记，推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术，...
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核酸检测的革命：可替代PCR的犀利技术
...ecombinasePolymeraseAmplification，RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp?核酸扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低，特别适合用于体外诊断、兽医、食品安...
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第五节 寡核苷酸探针的制备
...基对的错配。 因此，寡核苷酸探针的研究，对于提高核酸杂交技术的特异性和敏感性，扩大应用范围有重要意义。 常用的寡核苷酸探针有3种：①特定序列的单一寡核苷酸探针；②较短的简并性较高的成套寡核苷酸探针...
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艾滋病毒核酸检测方法研究进展
...疗的重要工具。本文主要描述了三种应用最为广泛的HIV-1核酸检测方法:逆转录酶链反应（RT-PCR/AmplicorTMHIV-1MonitorTest）基于核酸序列的扩增反应（NASBA/NucliSensTMHIV-1QTTest），以及枝状DNA技术（QuantiplexTMHIV-1RNATest）。关键词艾滋病毒...
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分子生物学检测在HP感染中的应用
...技术的发展，其在HP感染研究中的应用越来越广泛。 1核酸杂交技术 wetherall等于1988年最早用斑点膜杂交法将幽门螺杆菌HP基因组探针用于HP检测，并与32P、生物素、光敏生物素及半抗原磺基基团四种标记探针进行比较，结...
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幽门螺杆菌cagA基因探针的制备与临床应用
...1 575nts),扩增片段长约349bp。模板DNA为NCTC11637菌株基因组核酸。PCR扩增条件：预变性95℃300秒，变性96℃50秒，退火56℃50秒，延伸73℃60秒，最后一次延伸73℃300秒，循环次数为30次。制备基因探针时的PCR模板为克隆菌重组质粒DNA，...
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微生物分子生物学技术及其在环境污染研究中的应用
摘要：本文较为系统地概述了核酸探针检测技术、利用引物的PCR技术、DNA序列分析技术和电泳分离及显示技术的研究进展，并探讨了这些技术在环境污染研究中的应用及其方向，表明，这些被认为是重要的微生物分子技术，在探...
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常用的分子生物学基本技术简介
核酸分子杂交技术 由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本...
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核酸扩增技术在结核病诊断中的应用与进展
...生物学的迅猛发展，为临床实验室诊断提供了较为可靠的核酸检测方法。经典聚合酶链反应(PCR)扩增技术已广泛应用于结核病的诊断；然而，由于污染问题严重，扩增抑制物的存在，试剂盒缺乏规范化、标准化，加之技术、条件...
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第三节 分子生物学实验诊断技术
第三节 分子生物学实验诊断技术 一、核酸杂交技术 检验方法建立的基本要素是特异性和灵敏度，在复杂的物体中，使无法感觉的特定物质进入人类的观察范围。核酸杂交检测技术就是利用核酸碱基严格配对的特异性，...
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沙眼衣原体诊断研究进展
...而DFA对稀释至10-8后的EB仍可阳性，敏感性较EIA为高。 核酸扩增技术 近年来，随着分子生物学的发展，核酸扩增技术在常规感染的诊断中很快建立。这些技术主要有扩增探针（Ampliprobe）、聚合酶链反应（PCR）、连接酶链...
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分子生物学复习题
...酶切，凝胶电泳后，再转移至膜上与标记探针杂交的一种核酸分子杂交技术。特异性，敏感性，准确性具佳。主要用于检测基因组中特定的基因和序列，也常用于鉴定克隆DNA的特殊序列。实时PCR:是目前最好的分析mRNA的方法，基...
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分子生物学复习题
...酶切，凝胶电泳后，再转移至膜上与标记探针杂交的一种核酸分子杂交技术。特异性，敏感性，准确性具佳。主要用于检测基因组中特定的基因和序列，也常用于鉴定克隆DNA的特殊序列。实时PCR:是目前最好的分析mRNA的方法，基...
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尖锐湿疣
...酸白试验阳性，病理切片可见角化不良及凹空细胞。4．核酸杂交可检出HPV-DNA相关序列，PCR检测可见特异性HPV-DNA扩增区带。【治疗措施】由于目前没有特效的抗病毒药物，尖锐湿疣的治疗必须采用综合治疗。（一）治疗诱因：（...
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结核病分子生物学研究进展
...作量大，所以在临床实验室很难开展。 2.2DNA探针技术核酸探针是指用放射性或非放射性物质标记已知的DNA或RNA片段，然后用这种已知的核酸探针检测样品中未知的核苷酸顺序，如有完全互补的核苷酸顺序，则按碱基互补的原...
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链置换扩增术（SDA）及其进展
...体外等温扩增方法。在靶DNA两端带上被化学修饰的限制性核酸内切酶识别序列，核酸内切酶在其识别位点将链DNA打开缺口，DNA聚合酶继之延伸缺口3‘端并替换下一条DNA链。被替换下来的DNA单链可与引物结合并被DNA聚合酶延伸成...