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Naturemethods:高通量深度测序法探测RNA结构
...是为反式作用因子提供特异的结合位点。RNA转录物是一种单链分子,当其发生自身折叠并形成Watson-Crick碱基对,可生成各种长度和不同复杂性的发夹结构。发夹结构是RNA中最普通的二级结构形式,其进一步组装则形成了复杂的三...
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第十八章 诊断分子生物学基本技术--第一节 概述
...,以此类推成百上万的核苷酸结合可形成一条大分子核酸单链,单链之间的碱基再以氢键结合可形成较稳定的核酸大分子双链结构(二级结构)。 核酸的简写方式为5′AGCTGTAC3′,此外的英语字母已不代表碱基,而是指核苷...
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第二十三章 DNA重组技术及其在基因诊断中的应用--第一节 工具酶
...酶的切割可以有两种方式。一是交错切割,结果形成两条单链末端,这种末端的核苷酸顺序是互补的,可形成氢键,所以称为粘性末端。如EcoRI的识别顺序为: ↓|5’……GAA|TTC……3’3’...
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第二节 核酸分子杂交法
...断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组...
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分子杂交技术
...记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 一、双链DNA探针及其标记方法 分子生物研...
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5-1-2参与DNA复制的有关物质
螺旋酶(Helicase)单链DNA结合蛋白(SSBP)DNA拓扑异构酶(DNATopisomerase)引物酶(Primase)和RNA聚合酶(RNAPolymerase) DNA复制实际上就是DNA指导的DNA合成代谢。因此,必须有DNA作为复制的模板。体外复制实验证明,新合成DNA的特...
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常用的分子生物学基本技术简介
...突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针(probe),待测核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未...
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3-3病毒与蛋白质感染因子
...±DNA→+mRNA→蛋白质,如天花病毒、T-偶数噬菌体。 2)单链+DNA→±DNA→+RNA→蛋白质。 3)双链±RNA→+mRNA→蛋白质[3],如呼肠孤病毒。 4)单链+RNA→-RNA→+RNA→蛋白质脊髓灰质炎病毒。 5)单链-RNA→+RNA→+蛋白质,如流感...
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生物物理所刘迎芳课题组在抗病毒蛋白结构与功能研究方面取得新进展
...能也通过该区域结合核酸。我们设计了不同序列和长度的单链、双链的DNA和RNA,通过凝胶迁移实验(EMSA)研究了ISG58对核酸序列的选择性。EMSA的结果显示:ISG58和ISG54不同,它倾向于结合不同长度的单链RNA和双链DNA片段。相比较I...
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长春应化所在化学生物学生物分子识别领域取得可喜进展
...基酸Val的配合物可促进在体内复制及转录具有重要功能的单链prA及polydA产生二级结构;目前针对人类单链RNA聚合酶PAP为靶点的单链核酸药物报道很少,这些实验结果对单链核酸药物设计及揭示稀土生物学效应具有指导作用。(FEBSL...
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中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》卷
....是非题(共25分)1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链()2.分子量相同的两种蛋白质,如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同,,其摩尔消光系数可能不同()3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右()4.苯丙氨酸是...
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RNA也有双螺旋结构
...RNA)发挥着中介作用。RNA是一种可在细胞核糖体内发现的单链遗传物质。虽然其在通常情况下是单链的,但是某些RNA序列也能像DNA一样形成双螺旋结构。1961年,亚历山大·里奇、大卫·戴维斯、沃森以及克里克提出假说,被称为p...
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生物计算未来
...相似之处。 DNA由GTAC四种碱基构成,在其中的每一条单链上,碱基的顺序可以看做是随意的;而如果一条单链上某个位置的碱基是腺嘌呤A的话,另一条单链的对应位置上则必然是胸腺嘧啶T;鸟嘌呤G和胞嘧啶C也存在同样的对...
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分子生物学实验基础知识
...、扩增、表达的工具。载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记;有供外源DNA插入的位点;本身体积小等特征。 质...
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第二节 分子生物学实验基础
...、扩增、表达的工具。载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记;有供外源DNA插入的位点;本身体积小等特征。 质...
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第十八章 核酸分子杂交技术概述--第一节 核酸的分子结构
...核苷酸依3’,5’磷酸二酯键形成的多核苷酸链。RNA总是以单链的形式存在,也有5’磷末端及3’羟基末端。RNA单链的局部折叠成的某一片段的A及G分别与另一片段的U及C配对常形成发夹结构(hairpinstructure)。在此结构内的碱基无...
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英在地球早期环境模拟条件下合成类RNA
...由碱基、核糖和磷酸组成。DNA具有双螺旋的复杂结构,而单链的RNA在结构上更为简单和牢固。因此有学者认为,DNA过于复杂,不可能在瞬间突然出现。在生命最初产生时,DNA的单链“表亲”———RNA要先于DNA出现,是地球上最早...
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2-2-6核酸的变性和复性
...是及不可能的,核酸实验中经常以此方式保持DNA的变性(单链)状态。这说明降温时间太短以及温差大均不利于复性。 DNA浓度。复性的第一步是两个单链分子间的相互作用“成核”。这一过程进行的速度与DNA浓度的平方成正...
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第三节 分子生物学实验诊断技术
...imer或sense,人工合成),DNA多聚酶可识别并结合引物,以单链DNA为模板,dNTP为底物,合成其互补链。通过反复变性,反复合成互补链的过程,达到DNA扩增的目的。人的DNA扩增引物长度多为20个核甘酸。(图18-7)图18-7 PCR技术原...
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DNA电镜技术及其应用
...展状态。将变性剂(如甲酰胺等)加入展开液中,可以防止单链DNA分子内碱基非随机配对。细胞色素C展层技术不仅可以用于观察双链DNA分子(dsDNA),也可用于观察单链DNA分子(ssDNA),此时该方法也可称甲酰胺展层技术。展开液(上相液...
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厦门大学生科院等miRNA研究成果发表于《Immunity》
...SC)。RISC通过Dicer中解旋酶的作用将双链RNA变成两个互补的单链RNA,然后单链RNA识别细胞内与其互补的靶RNA分子,并与之互补结合,这时Dicer中的核酸内切酶将RNA分子切断,从而使靶RNA分子失去编码蛋白质的功能。植物、线虫、动...
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2-2生物化学与分子生物学技术
...起来的一种技术。其原理是,具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段,在适当条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA,DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。 (一...
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实验室常用技术参数资料(一)
...g (2)分光光度换算: 1A260双链DNA=50μg/ml 1A260单链DNA=30μg/ml 1A260单链RNA=40μg/ml (3)DNA摩尔换算: 1μg100bpDNA=1.52pmol=3.03pmol末端 1μgpBR322DNA=0.36pmol 1pmol1000bpDNA=0.66μg 1pmolpBR322=2.8μg 1kb双链DNA(钠...
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PCR-SSCP技术
...用. 一、SSCP的原理及特点 日本Orita等研究发现,单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或少地影响其空间构象,使构...
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RNA干扰作用原理及其应用
...电有利于与RNA带负电的磷酸骨架结合。siRNA解旋后,siRNA单链的3‘端伸入PAZ的裂缝中,整个单链沿着PAZ伸展开,同时目的片段mRNA结合于新月型底座。mRNA与siRNA互相配对形成双链后,在离单链siRNA5‘端9个碱基处(即离siRNA3‘端11-12...
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2-1-2病毒基因组的结构和功能
...共存于同一病毒颗粒中。组成病毒基因组的DNA和RNA可以是单链的,也可以是双链的,可以是闭环分子,也可以是线性分子。如乳头瘤病毒是一种闭环的双链DNA病毒,而腺病毒的基因组则是线性的双链DNA,脊髓灰质炎病毒是一种单...
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转基因技术让蚊子不再传染登革热
...毒的能力。 据介绍,通常的RNA(核糖核酸)病毒都是单链结构,但登革热病毒在生命周期中存在着一个短暂的RNA(核糖核酸)双链时期,科研人员就是利用了这一弱点去除了病毒的活性。在这个短暂的双链时期中,可以用dic...
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第三节 DNA的二级结构与功能
...复存在(图15-7)。进一步的分析还证明,Z-DNA的形成是DNA单链上出现嘌呤与嘧啶交替排列所成的。比如CGCGCGCG或者CACACACA。图15-7 Z-DNA和B-DNA Z-DNA有什么生物学意义呢?应当指出Z-DNA的形成通常在热力学上是不利的。因为Z...
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天津大学2002年招收攻读硕士研究生入学试题生物化学
...抗剂;(4)阿糖胞苷11.下列与DNA解链无关的是()(1)单链DNA结合蛋白;(2)DNA酶;(3)DNA旋转酶;(4)拓扑异构酶II12.下列关于癌变的论述,哪一项是正确的()(1)有癌基因的细胞便会转变为癌细胞;(2)一个癌基因的...
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核酸检测的革命:可替代PCR的犀利技术
...应。RPA技术的基本原理RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37°C左右。ViaFect转染试剂重组酶与...