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研究观测到正准备修复的DNA单链
...维斯分校的研究人员第一次成功观测到了正准备修复的DNA单链。相关研究成果发表在10月24日的《自然》(Nature)杂志上,对于我们了解乳腺癌的起源具有重要意义。论文的资深作者、加州大学戴维斯分校著名微生物学和分子与...
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5-3-2同源重组
...。重组时,两个DNA自从片段必须有一个发生断裂或有一段单链缺失(称为“空隙gap”)。因此,许多DNA损伤因素,像UV照射、X光辐射、和诱变剂等均可使重组频率增高。 一、RecA蛋白在重组中的功能 RecA蛋白是recA基因的产...
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5-1-2参与DNA复制的有关物质
螺旋酶(Helicase)单链DNA结合蛋白(SSBP)DNA拓扑异构酶(DNATopisomerase)引物酶(Primase)和RNA聚合酶(RNAPolymerase) DNA复制实际上就是DNA指导的DNA合成代谢。因此,必须有DNA作为复制的模板。体外复制实验证明,新合成DNA的特...
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观察单链DNA与其结合蛋白的相互作用
在复制或修复过程中双链DNA必须解链成单链才能让功能分子结合并发挥他们不同的运作。细胞内蛋白特异地与单链DNA结合以阻止DNA的提前重组。不幸的是,这些DNA与蛋白质相互作用的详细研究因需要昂贵的仪器与耗时的标记技术...
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发现单链DNA结合蛋白的重要功能
...告,研究人员对大肠杆菌(Escherichiacoli)研究中,首次发现单链DNA结合蛋白(single-strandedDNA-bindingprotein,SSB)能够在单链DNA上能随机地来回移动,并协同其他蛋白质对单链DNA完成修复,重组或复制的功能。在复制和重组过程中,dsDNA解...
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5-1-3DNA聚合酶(DNAPolymerase)
...,5‘端带有-OH或带有一磷酸、二磷酸、三磷酸二级结构单链或双链DNA中不配对的末端双链DNA的配对碱基末端产物只有5‘-单核苷酸5‘-单核苷酸占80%,寡核苷酸20%内切酶作用无可切割从末端起8-100个核苷酸处的二酯键聚合作用对...
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第二十三章 DNA重组技术及其在基因诊断中的应用--第一节 工具酶
...酶的切割可以有两种方式。一是交错切割,结果形成两条单链末端,这种末端的核苷酸顺序是互补的,可形成氢键,所以称为粘性末端。如EcoRI的识别顺序为: ↓|5’……GAA|TTC……3’3’...
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PCR-SSCP技术
...用. 一、SSCP的原理及特点 日本Orita等研究发现,单链DNA片段呈复杂的空间折叠构象,这种立体结构主要是由其内部碱基配对等分子内相互作用力来维持的,当有一个碱基发生改变时,会或多或少地影响其空间构象,使构...
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分子杂交技术
...记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 一、双链DNA探针及其标记方法 分子生物研...
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用PCR-SSCP区分不同来源的幽门螺杆菌
...报道的几种基因型技术使Hp的分型鉴定成为可能,而PCR及单链构象多态性(Signle-strandconformationpolymorphisms,SSCP)分析在菌株分型鉴定中的应用则尚未见报道。作者采用PCR-SSCP分析区分不同来源的Hp,并探讨其应用价值。 1材料和...
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单链DNA易位可激发碳纳米管出现强电流
美国科学家近日揭示了单链DNA在穿越碳纳米管时发生的“易位过程。这一过程可引发电流的不规则激增,而其中涉及的电子信号特性,或可为纳米孔技术在快速DNA测序中的应用提供帮助。美国亚利桑那州立大学生物设计研究...
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革兰氏阳性细菌的转化
...定位点结合,并激活临近的核酸酶。 DNA双链中的一条单链逐步降解,同时另一条单链逐步进入细胞。 3整合复合物前体的形成 一种特殊蛋白与单链DNA结合,有效保护单链DNA免遭核酸酶的降解,并将其引导至受体菌染...
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生物计算未来
...相似之处。 DNA由GTAC四种碱基构成,在其中的每一条单链上,碱基的顺序可以看做是随意的;而如果一条单链上某个位置的碱基是腺嘌呤A的话,另一条单链的对应位置上则必然是胸腺嘧啶T;鸟嘌呤G和胞嘧啶C也存在同样的对...
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第二节 常用基因诊断技术
...(Southernblot) 基本原理是:硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强,当电泳后凝胶经过DNA变性处理,覆以上述滤膜,再于其上方压上多层干燥的吸水纸,借助它对深盐溶液的上吸作用,凝胶上的单链DNA将转移到滤膜...
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单链DNA合成之父——美科学技术奖生命科学领域获奖者介绍(一)
发明单链DNA合成法的MarvinH.CaruthersMarvinH.Caruthers是美国科罗拉多大学博尔德分校杰出的化学和生物化学教授。他在DNA合成科研领域享有极高的声望,并且是有名的发明家,持有生物技术产业多项制造技术专利。20年前,在前人的工...
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第二节 DNA的序列测定
...双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要:DNA聚合酶,单链DNA模板,带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物,4种dNTP(dATP、dGTP、dTTP和dCTP)。聚合酶用模板作指导,不断地将dNTP加到引物的3'-OH末端,使引物延伸,合成出新的...
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第十八章 诊断分子生物学基本技术--第一节 概述
...,以此类推成百上万的核苷酸结合可形成一条大分子核酸单链,单链之间的碱基再以氢键结合可形成较稳定的核酸大分子双链结构(二级结构)。 核酸的简写方式为5′AGCTGTAC3′,此外的英语字母已不代表碱基,而是指核苷...
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第二节 DNA的变性与复性
... DNA变性是指双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,形成单链无规则线团,因而发生性质改变(如粘度下降,沉降速度增加,浮力上升,紫外吸收增加等),称为DNA变性。加热、改变DNA溶液的pH、或受有机溶剂(如乙醇、尿素、...
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物理所通过单分子动力学研究阐释UvrD解旋酶的工作机理
...界拉力对UvrD解旋效率的影响,发现作用于DNA分开的两个单链端点、且使DNA失稳的拉力反而抑制该解旋酶的工作。这与以前报道过的T4解旋酶[PNAS,104(2007)19790]和T7解旋酶[Cell,129(2007)1299]有明显区别,说明UvrD是一个有特殊作用机制的...
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科学家用DNA造出人工神经网络
...称为链置换级联的过程来构造DNA神经网络。这一方法用到单链和部分双链的DNA分子。部分双链是指,单链从双螺旋结构的末端像尾巴一样延伸出来。在水溶液中自由浮动时,一个单链会碰上一个部分双链,如果它们的碱基(DNA序...
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重要蛋白Aprataxin同源物Hnt3与DNA复合物的晶体结构研究获重要成果
...,遗传不稳定增加及癌症。在各种不同类型的DNA损伤中,单链断裂最常见,每天在细胞中发生的频率成千上万,如果修复错失即导致疾病。近期发现一种遗传性神经变性病I型共济失调伴眼动失能症(AOA1)与一类DNA单链损伤修复蛋...
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3-1-1转录:RNA的生物合成引言
RNA几乎总是单链的。但几乎每个RNA分子都有许多短的双螺旋部分,称为发夹。这是因为在发夹中,一条RNA链上的两个节段是反平行走向的,可形成碱基对而产生双螺旋区。此外,除了标准的GC和AU对之外,还有较弱的GU对可帮助形...
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丙型肝炎病毒包膜蛋白E2人源单链可变区抗体的筛选与鉴定
...他试剂均为国产分析纯。 1.2特异性HCVE2噬菌体人源单链可变区抗体的筛选首先将噬菌体抗体库扩增活化,用辅助噬菌体M13K07侵染后37℃培养12小时,浓缩噬菌体。用HCVE2抗原(20mg/L)包被Nunc培养板,包被液为0.05MNaHCO3,pH9.6缓冲...
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长春应化所在化学生物学生物分子识别领域取得可喜进展
...基酸Val的配合物可促进在体内复制及转录具有重要功能的单链prA及polydA产生二级结构;目前针对人类单链RNA聚合酶PAP为靶点的单链核酸药物报道很少,这些实验结果对单链核酸药物设计及揭示稀土生物学效应具有指导作用。(FEBSL...
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HCV非结构蛋白NS5A人源单链抗体可变区基因的筛选与鉴定
HCV非结构蛋白NS5A人源单链抗体可变区基因的筛选与鉴定中华微生物学和免疫学杂志2000年第6期第20卷基因工程抗体作者:成军 钟彦伟 施双双 王刚 董菁 夏小兵 杨继珍 陈菊梅单位:解放军302医院传染病研究所基因治疗...
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一种可同时检测抗双链和单链DNA抗体的快速斑点免疫金渗滤试验
一种可同时检测抗双链和单链DNA抗体的快速斑点免疫金渗滤试验中国免疫学杂志1999年第5期第15卷免疫学技术与方法作者:兰小鹏 涂向东 黄俏佳 冯修高 唐玉钗 朱忠勇 周明宣① 陈学香①单位:兰小鹏 涂向东 黄俏...
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中国科大揭示染色体复制叉停滞重启的引发体组装新模式
...在大肠杆菌DNA损伤修复过程中重要组件引发体蛋白DanT与单链DNA复合物的晶体结构中,发现了一种全新的三螺旋束与单链DNA的结合模式,阐明了DanT与单链DNA之间的相互识别分子机制。7月22日NucleicAcidsResearch在线发表了该研究成果...
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5-1-5DNA复制的过程
...过转录激活合成的RNA分子也起分离两条DNA链的作用,然后单链DNA结合蛋白质结合在被解开的链上。由复制因子X(n蛋白),复制因子Y(n‘蛋白),n“蛋白,i蛋白,dnaB蛋白和dnaC蛋白等6种蛋白质组成的引发前体(preprimosome),在...
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链置换扩增术(SDA)及其进展
...继之延伸缺口3‘端并替换下一条DNA链。被替换下来的DNA单链可与引物结合并被DNA聚合酶延伸成双链。该过程不断反复进行,使靶序列被高效扩增。本文主要介绍SDA的原理及其发展。 关键词链置换扩增术;DNA检测 近几年...
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一种更为精确的基因组编辑方法
...于是,Kim和他的同事开发出了切口酶,这是一种每次切开单链DNA,引入新遗传物质的酶。由于切口酶只切割单链,而不是像标准核酸酶那样切割双链,故不想要的切口可由细胞内部的单链断裂修复机制快速修复。研究小组利用Fok...