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广州生物院首次研制出稳定携带报告基因的复制型流感病毒
...edinneuraminidasesegment。该成果首次报告成功研制了稳定携带报告基因的复制型甲型流感病毒。近年来,流感病毒的流行以及快速变异对人类健康提出了严峻的挑战,因此流感病毒的致病机理亟待进一步阐明,人类也迫切需要更为安...
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新复制型流感病毒可完整保留其基因组
...ortergeneharboredinneuraminidasesegment,首次成功研制了稳定携带报告基因的复制型甲型流感病毒。流感病毒的流行以及快速变异已经对人类健康提出了严峻挑战,流感病毒的致病机理亟待进一步阐明,人类也迫切需要更为安全有效的新...
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HLA-B27启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其在Hela细胞的转录调控研究
...病学杂志》2007年第11卷第8期中国研究者构建了荧光素酶报告基因(luc)与HLA-B27启动子融合蛋白哺乳动物细胞表达载体,观察其在Hela细胞的表达调控。研究者克隆出HLA-B27启动子序列(432bp),构建pGL4.14/B27pro-luc融合蛋白表达...
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酵母双杂交体系的新发展
...用就可以将BD和AD在空间结构上重新联结为一个整体而与报告基因的上游激活序列(upstreamactivationsequence)结合,进而发挥激活转录的功能,使受调控的报告基因得到表达。根据这一原理,双杂交系统通过简便的酵母遗传分析对报...
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陈凌研究组2011发多篇文章解析病毒
...另外一篇文章中,研究人员首次报告成功研制了稳定携带报告基因的复制型甲型流感病毒。这一突破性研究成果不但为流感病毒的基础研究,也为流感疫苗、抗流感病毒药物和抗体的研发提供了强有力的工具,相关报道公布在著...
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上海巴斯德所肿瘤疱疹病毒周期调控研究获进展
...生林先志等在蓝柯研究员指导下,通过构建含RTA3’UTR的报告基因,对所有KSHV编码的pre-miRNA表达质粒进行筛选,发现KSHV编码的多个miRNA能够下调报告基因的表达。其中miR-K12-9和miR-K12-7对报告基因的下调在不同细胞系中重复验证。R...
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Nature新闻:寻找癌症“狙击手”
...因与癌症存在关联,但是这种基因更多的是作为一种衰老报告基因。很早以前,科学家们就已经发现p16ink4a(p16)基因能够激活一种重要的肿瘤抵抗机制:细胞衰老,从而在衰老和癌症抑制方面发挥作用。随着细胞年龄的增长,DNA...
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NCLs致病相关基因CLN8酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活作用的检测
...细胞EGY48中,β-半乳糖苷酶滤膜分析检测重组诱饵质粒对报告基因LacZ的自激活情况。结果扩增出目的基因片段,成功构建了重组诱饵质粒plexA-cln8,经酶切和测序鉴定正确;重组诱饵质粒无自发激活报告基因功能。结论重组诱饵质...
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应用LacZ报告系统研究白念珠菌HYR1基因的启动子活性
...相关的启动子片段。方法采用PCR、基因重组、酵母转化和报告基因测活,比较不同HYR1基因上游1800bp内不同片段的启动子活性。结果-400~-200bp区域存在启动调控活性,其他区域未见相关的启动活性。结论在HYR1基因上游-400~-200bp间存...
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短脉冲超声波促进肿瘤基因治疗
...脉冲HIFU处理小鼠中的肿瘤,然后迅速将一种易于测量的报告基因注射进它们尾巴的静脉中。这种报告基因是一种存在于深海无脊椎动物中的绿色荧光蛋白,它能在被脉冲HIFU照射过的肿瘤的所有部分中看到。但是没有用脉冲HIFU处...
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microRNA在心脏细胞生长及分化过程中的作用
...miRNAs十分困难,所以研究人员利用了一个可以产生蓝点的报告基因来便于定位miRNAs。他们将报告基因接到miR-1-1的前端,结果发现在胚胎期小鼠的心脏和肌肉中都发现有报告基因的表达,并且这种表达受到几个心脏和肌肉关键转...
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北大汪南平教授阐释miRNA的新功能
...9a的细胞系。多项分析表明,miR-19a的稳定转染显著减低了报告基因(此报告基因被cyclinD1基因的3’端非翻译保守区所控制)的表达以及cyclinD1的蛋白水平,使细胞周期停滞在G1/S期。当内源miR-19a被抑制后,这种抑制作用减弱。这...
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疟原虫基因转染的研究进展
...暂表达。 短暂转染常用于基因调控的快速分析,通过报告基因的转录表达即可分析调控基因在基因表达调控中的确切作用。但在很多方面的研究和应用中稳定转染是必需的。 1.2稳定转染 与短暂转染不同,稳定转染(...
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细胞因子对小鼠α2(I)型前胶原基因启动子活性影响的研究①
...子(-2kb~+54bp)为靶序列,将它与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因组成的重组体pAZ1009用脂质体法转染至胶原产生细胞NIH/3T3细胞,讨论IFNα、IFNγ、TNFα对小鼠α2(I)型前胶原基因上游启动子活性的影响。结果:TNFα抑制小鼠α2(I)型...
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抗纤复方及TGF-β对胶原基因启动子活性的影响①
...kb启动片段为研究靶序列,以氯霉素乙酰基转移酶(CAT)作报告基因,应用基因转染技术研究小鼠胶原启动子活性。结果:TGF-β可促进小鼠前胶原α2(Ⅰ)基因启动序列的启动活性,而中药抗纤复方可明显抑制其启动活性。结论:TGF-...
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乙型肝炎病毒前S蛋白作为“饵”载体的构建及表达
...一个完整的有活性的转录因子,激活由DNA-BD结合的UAS下游报告基因的转录表达。因此,可通过报告基因是否被转录来研究两蛋白间的相互作用。酵母双杂合系统属于体内实验,完全模拟体内环境下的两个蛋白间相互作用。体内反...
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北大接连发表Nature,PNAS文章
...9a的细胞系。多项分析表明,miR-19a的稳定转染显著减低了报告基因(此报告基因被cyclinD1基因的3’端非翻译保守区所控制)的表达以及cyclinD1的蛋白水平,使细胞周期停滞在G1/S期。当内源miR-19a被抑制后,这种抑制作用减弱。这...
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硅纳米颗粒在植物转基因上的应用
...。 FrancoisTorney和他的同事利用该技术将绿色荧光蛋白报告基因分别转入了烟草和玉米细胞中,雌二醇作为诱导物被同时转入,另设不转雌二醇诱导物的对照。研究发现,在不用金粉覆盖硅颗粒的情况下,由于雌二醇释放从而...
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构建可诱导性真核表达载体为观察肿瘤奠定基础
...,是目前基因治疗研究中的重要课题,而选择一种理想的报告基因和标记基因是解决此问题的关键。源于维多利亚水母的GFP是新近发现的一种报告基因。GFP由238个氨基酸组成,它们在各种真核细胞中都可作为定位各种蛋白质的标...
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利用荧光噬菌体开发出更快速简便的检测结核病方法
...和更简便的检测方法。荧光噬菌体(fluorophage)是携带荧光报告基因的细菌病毒。研究人员利用该噬菌体去感染从病人肺部咳出的含有结核菌素(tuberculin)唾液中的分枝杆菌。几个小时之内,被感染的细菌表达报告基因而且发出的荧...
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中科院昆明动物所:发现人类大脑中存在特有基因剪切体
...异表达的剪切体。通过物种间的序列比较分析和细胞水平报告基因的实验,他们发现在人类neuropsin基因内涵子中的一个点突变导致了新的剪切体的产生。将黑猩猩 neurospin基因的相应位置突变为人类的序列后,黑猩猩的基因在报...
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我国自主研发出三维光学成像平台
...体层摄影(BLT)和三维重建平台引人注目。 BLT是新型报告基因光学成像手段,临床前研究证实,BLT可以监测体内多种生理及病理过程,并在药物研发、疾病早期诊断和治疗监测方面具有很大的应用潜力。目前该团队刘俊廷博...
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昆明动物所发现人类大脑特有的基因剪切体
...异表达的剪切体。通过物种间的序列比较分析和细胞水平报告基因的实验,他们发现在人类neuropsin基因内涵子中的一个点突变导致了新的剪切体的产生。他们将黑猩猩neurospin基因的相应位置突变为人类的序列后,黑猩猩的基因在...
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进化信息照亮了果蝇Toll通路配体蛋白功能表面
...聚体头部的色氨酸环区。运用进化指导的定点突变策略和报告基因系统,科研人员证实了一些印迹残基及其邻位氨基酸的突变能够显著降低Drosomycin启动子的活性,其中色氨酸环区的突变几乎完全阻断了报告基因的表达,表明该...
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我科学家用CRISPR制备基因敲入猪
...员通过CRISPR/Cas9介导的基因组编辑,制备了携带Oct4-tdTomato报告基因的基因敲入猪。中科院广州生物医药与健康研究院的赖良学、QingjianZou和云南农业大学的曾养志教授是本文共同通讯作者。转基因猪在农业和生物医药方面都有着...
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绿色荧光蛋白高表达动物模型的建立及在活体成像中的应用*
...白(greenfluorescentprotein,GFP)基因是光学分子成像最常用的报告基因,利用它标记Lewis肺癌移植瘤国际尚未见有报道,本研究建立荷GFP基因标记的小鼠Lewis肺癌(Lewislungcarcinoma,LLC)移植瘤裸鼠模型,应用自行研制的荧光成像仪进行...
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刘晓:单细胞表达谱不同维度感受基因的精彩
...表达的分析吗?刘晓:我们是用一种红色荧光蛋白(cherry)报告基因来测量基因启动子的活性。所以更确切的说我们获得的是启动子的转录图谱,不涉及转录后的调控。已测量的93个基因都编码蛋白质,其中60个是转录因子。我们下...
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hNaDC1基因5’侧翼区转录调控序列系列载体构建与鉴定
...建hNaDC1基因5’侧翼区转录调控序列系列萤火虫荧光素酶报告基因表达载体。方法PCR扩增获得hNaDC1基因5’侧翼转录调控区不同长度片段:hNaDC1A(-2232/+136,2368bp)、hNaDC1B(-1640/+136,1776bp)、hNaDC1C(-1084/+136,1221bp)、hNaDC1D(-253/+...
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RNA干扰靶向抑制胃癌SGC7901细胞COX2基因和蛋白表达的研究
...中COX2基因和蛋白的表达。结果TOPtranfection能够有效介导报告基因DNA(pcDNA/lacZ)转染SGC7901细胞,细胞转染率为56.0%,明显优于其它两种转染试剂,转染的pcDNA/lacZsiRNA对报告基因产生显著抑制;TOPtranfection介导的COX2siRNA有效抑...
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siRNA表达载体
...C2C12细胞中,用长链具有发卡结构的双链RNA有效的阻断了报告基因的表达,在稳定表达具有发卡结构的双链RNA的细胞株中,报告基因的表达被长期的阻断了。带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星...