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牛凝血酶的制备和纯化
.../mL)生理盐水浸液,37℃水浴1h,测定凝血酶活性。 4.凝血酶粗酶液的制备 按最佳激活条件(Ca2+0.05mol/L,37℃,30min),分别将2项制备的溶液激活,用相对分子质量截留量10000的超滤器超滤。待超滤液中加入0.1mol/LAgNO3溶液不出现絮状沉淀时...
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VPA解除Met对大鼠皮质神经元GAD表达的抑制
...代培养技术分组培养大鼠皮质神经元，收集细胞、制备GAD粗酶提取液，用比色法测定粗酶提取液GAD活力；分析空白组（无血清培养液）、Met组（无血清培养液含终浓度为2mM的Met培养3天后换以无血清培养液）、VPA组（无血清培养...
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SOD活性菌株Yb0101发酵条件的研究
...件。结果温度30℃，装液量40ml、发酵时间21h发酵后所得的粗酶液SOD活力最高。尿素浓度0.2%、0.4%时，以及硫酸铵浓度0.2%时，SOD活力均增加，但生物量均减少。结论适宜条件下，Yb0101产生SOD活力最高。【关键词】超氧化物歧化酶SOD...
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阿魏酸糖酯抗氧化性的研究
...定容25ml，分装于1.5ml的安瓿瓶中，-18℃保存备用。1．2.3粗酶液的提取称取2.0g果肉放入研钵中，在液氮中充分研磨，然后将研钵内的果肉转移至离心试管中，取9ml缓冲液充分冲洗研钵后将其转至离心试管中。在10000r/min下离心15min...
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壳聚糖酶的研究进展
...letier等以片状壳聚糖作为唯一碳源诱导产生了壳聚糖酶，粗酶液的酶活力可达1U/ml。Shimosaka等用2%的凝胶化壳聚糖培养基诱导Frusariumsolant产生了壳聚糖酶，酶活力高达9.9mU/ml。Shimosaka还发现氮源的成分对壳聚糖酶的产生有着较大的...
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天津工生所1,3-1,4-β-D-葡聚糖酶的晶体结构研究获进展
...，为了满足工业发酵生产的要求，首次尝试在酵母中表达粗酶。V18Y突变蛋白的粗酶值提高了2摄氏度，而W203Y突变蛋白粗酶的比活性提高了30%。为了进一步评价结构与功能的关系，本实验在酵母和大肠杆菌中进行了一些突变体的...
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成都生物所三发明专利获得国家专利授权
...中脂肪氧化酶活性进行单粒、定量测定的方法，包括提取粗酶、亚油酸底物溶液的配制、淀粉液的配制、碘化钾溶液的配制、柠檬酸溶液配制、粗酶活性的测定六个步骤，其使用设备简单、操作简便、测量迅速、通量高、测定结...
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细菌cellulase活性的检测方法
...用Monod恒温振荡器,将缝纫机线(15支纱)的一端浸入含有5ml酶液的试管中, pH5.0,40℃,72r·min-1振荡测定纱线切断所需时间,以此来得到酶活力。 2.滤纸崩溃法 采用Monod恒温振荡器,将两片滤纸(1×1cm)加入装有5ml酶液试管中,40℃,...
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丝裂素活化蛋白激酶介导神经肽Y促心肌细胞肥大效应
...鉴定。 1.3MAPK活性测定方法基本按文献［3］。1.3.1MAPK酶液的制备乳鼠心肌细胞用含10%新生牛血清的M199培养液培养，接种于95mm直径的培养皿，48h后换为无血清培养液，于接种后72h加不同干预因素。干预因素分组及终浓度:Control...
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成都生物所一种高产降粘酶系的菌种获发明专利
...降粘酶系菌株的筛选和发酵产酶条件的优化，利用其发酵粗酶液，通过简单的操作工序，即可降低薯类原料粘度，达到很好的预处理效果。有效解决制约我国薯类原料发酵的成本问题，大幅度提升我国薯类原料发酵的可行性和经...
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同位素技术四－－放射性测量
...质。溶剂在闪烁溶液中约占99％，因此，它的纯度对闪烁液的品质是很大的影响因素。溶剂中不发光的杂质、氧和水的含量多少，都关系到淬灭程度。原则上讲，溶剂应具有闪烁纯，即不含或很少含有影响闪烁计数的淬灭成分。...
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医院感染生物被膜铜绿假单胞菌β-内酰胺酶活性检测
...菌悬液中孵育，诱导其产生β-内酰胺酶。1.2.4β-内酰胺酶粗酶提取液的制备A、B、C、D4组菌孵育至第五天，将PA硅胶膜及胰酶大豆肉汤在超声水浴震荡（120W，15min），将细菌从硅胶膜片上脱下，用戊二醛固定，硝酸银染色，对苯二...
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大孔吸附树脂分离、纯化中药提取液的应用及展望
...应用并完善之。 一、大孔吸附树脂分离，纯化中药提取液的应用应用大孔吸附树脂分离，纯化中药提取液最早开始于七十年代末，到目前，在对中药有效成分的分析以及中药制剂中的应用都取得了一些满意的结果，分别归纳如...
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蛋白质组研究酶解常见问题
...。如果酶解的样品少，可以用储存液来稀释，这样剩余的酶液可以在-800C保存到下次使用。 3.Roche的酶和Promega的酶，那个更好？ Roche的酶有自降解，而Promega的酶基本上没有自降解。由于酶的自降解峰可以用来做很好的内...
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李里特破译玉米芯“宝藏”密码
...完全解决了低聚木糖生产的酶解效率和产物组成问题，使粗酶液酶活力在原有基础上提高了25倍。“找到了活力高的酶，就等于找到了开启玉米芯宝藏之门的钥匙，用玉米芯制备低聚木糖在中国完全可以成为现实。”李里特兴奋...
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大孔吸附树脂分离、纯化中药提取液的应用及展望
...应用并完善之。 一、大孔吸附树脂分离，纯化中药提取液的应用应用大孔吸附树脂分离，纯化中药提取液最早开始于七十年代末，到目前，在对中药有效成分的分析以及中药制剂中的应用都取得了一些满意的结果，分别归纳如...
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利用IFNγ-ELISPOT评价肝癌复合表位抗原的细胞免疫反应
...Streptavidin-AlkalinePhosphataseConjugate），每孔加入1:5000的稀释酶液100μl，37℃孵育1h；（13）清空孔内液体，100μl0.1%Tween20PBS清洗ELISPOT板3次，拍干ELISPOT板直至没有残留液体；（14）在每孔中加入100μl即用型BCIP/NBT底物反应液。室温...
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抗夜蛾的转基因西红柿
...柿品种。这些转基因品种表达土豆中编码的多酚氧化酶（PPO）基因。该种基因已被证实可催化酚类物质转化成醌类物质，这些次级代谢产物可使植物具有假单胞杆菌抗菌性。夜蛾在转PPO基因的西红柿品种中生长速率是其在非转基...
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手术室器械在供应室集中清洗消毒的临床实践
...理，然后置于清洗消毒机内清洗;空腔器械先置于加有多酶液的超声清洗器机洗，再用专用刷子刷洗，水枪冲洗后再由清洗消毒机清洗，之后再统一包装、灭菌与发放。 1.2.2循环使用2周后检查 器械在经过消毒供应室处理...
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注射用胶原酶对不同亚型胶原蛋白水解率的研究
...胶原酶用生理盐水溶解稀释至6.0u/ml，用前配制。除供试酶液外，按表1配制各反应体系，混匀后37℃预热5min。样品组、酶对照分别加1ml供试酶液，并混匀置37℃水浴进行反应。间隔10min取各反应体系的反应液0.25ml，加90μl无水乙醇...
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大孔吸附树脂分离纯化技术专题讨论会会议纪要
...标准：标准内容应包括“大孔吸附树脂分离纯化中药提取液的技术要求（暂行）”所要求的内容，并增加重金属含量检查。苯乙烯骨架型大孔吸附树脂残留物检查项目暂订为：苯（＜2ppm）、甲苯（＜890ppm）、二甲苯（＜2170ppm）...
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猪血小板衍生生长因子的提取和纯化
猪血小板衍生生长因子的提取和纯化 摘 要 目的：建立简单、有效的猪血小板衍生生长因子（pPDGF）纯化方法。方法：采用超声裂解、酸醇抽提、离子交换色谱、凝胶色谱等方法提纯pPDGF，用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其...
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猪血小板衍生生长因子的提取和纯化
猪血小板衍生生长因子的提取和纯化 摘 要 目的：建立简单、有效的猪血小板衍生生长因子（pPDGF）纯化方法。方法：采用超声裂解、酸醇抽提、离子交换色谱、凝胶色谱等方法提纯pPDGF，用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其...
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4种中药注射液与2种输液配伍的微粒观察
...药典》不溶性微粒测定法进行试验。结果中药注射液与输液的配伍液中的微粒数较输液有显著增加，注射液原液及其纯化水稀释液的微粒总量基本相同。结论中药注射液与输液配伍后的微粒情况应引起重视，中药注射液可增加不...
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美国医疗保健制度的改革措施
...dicare）的人加入健康维持组织（HMO）和优先提供者组织（PPO）。并且，做出了要致力于保险文件的标准化等决定［2］。这些方案当然不需要大的投资预算，或许确实正趋向于改善的方向，但其缺点是对大局没有影响，因为对大...
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DNA酶切及凝胶电泳
...l,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在管底。此步操作是整个实验成败的关键,要防止错加，漏加。使用限制性内切酶时应尽量减少其离...
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蚯蚓活性成分与应用研究进展
...子爱胜蚓（Eiseniafoetida）中得到了单组分酶，活力收率为粗酶粉的19.1%，具有极强的纤溶活性，其分子量为30kD，比活力达6667U/mg蛋白，在pH4～11及25℃～55℃内稳定。赵晓瑜等［10］从太平二号蚓（Eiseniafoetida）匀浆也进一步提取获...
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金银花中绿原酸的分离纯化
...体积2OμL．1．3实验方法1．3．1检测方法的建立1)标准品溶液的制备精确称取绿原酸对照品2.4mg置于50mg量瓶中，加入流动相溶解并稀释到刻度，摇匀，得每1mL含0.048mg的对照品溶液．2)线性关系考察精密量取对照品溶液1.0、2.0、3.0、...
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可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质研究
...对活力。1.2.5.2 最适作用温度 分别取一定量上述两种酶液，在30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃温度下，测定其活力，计算两者在各个温度下的相对活力。1.2.5.3 Km值 取上述两种酶液，在最适反应条件下，测定不同浓...
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DNA酶切
...l,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在管底。此步操作是整个实验成败的关键,要防止错加，漏加。使用限制性内切酶时应尽量减少其离...