化验及医学检查 血液生化检查 蛋白质测定
血液中加入氧化还原染料煌焦油蓝,经37℃孵育后,HbH因氧化变性而发生沉淀,呈颗粒状,被染色深蓝色,均匀而弥温地分散在红细胞内。
Heinz小体生成试验
变性球蛋白小体生成试验
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血液
将乙酰苯肼加至被检血中,37℃温育后,即可生成红细胞包含体(变性珠蛋白小体)。
(1)抗凝剂:肝素、EDTA或草酸盐。
(2)缓冲液:0.066mol/L KH2PO413份加入0.066mol/L Na2HPO4B7份,配成pH7.6溶液,在100ml上述溶液中加入葡萄糖200mg。此溶液置于4℃下保存,如此液呈现云雾状,则应丢弃。
(3)乙酰苯肼溶液:在室温中取乙酰苯肼100mg溶于100ml上述缓冲液。此溶液应于配后1h内使用。
(4)5g/L甲紫盐水溶液:甲紫0.5g溶于9g/L氯化钠100ml水中。
(1)用去纤维蛋白或肝素、EDTA、草酸盐抗凝,取被检血和正常对照血。
(2)取试管(7.5cm×1.2cm)2支,一管加入乙酰苯肼缓冲液2ml,再加入被检抗凝血0.1ml,另一管加乙酰苯肼缓冲液同量,再加入正常血0.1ml,作为对照。
(3)以滴管将上述二管混合液吸吹数次,置37℃温育2h,再以滴管吸吹数次,再放于37℃温育2h。
(4)染色:取上述混合液1滴置载玻片上,加2~3滴甲紫盐水溶液,混匀。
(5)覆以盖玻片,5~10min后在显微镜下观察变性珠蛋白小体。
含有5个以上变性珠蛋白小体的红细胞,正常人占0%~28%平均值为11.9%。在G-6-PD缺乏者平均可达67.8%有的作者提出32.5%为正常与异常的分界限。
与变性球蛋白小体染色试验相同。
增多:不稳定血红蛋白病、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏症、伯氨喹啉型溶血型贫血。
(1)缓冲液和乙酰苯肼浓度,加入血量的多少及保温时间均对结果有一定影响,故检查时的标准应力求一致。
(2)用滴管吸吹,是使红细胞与氧充分接触,这对变性珠蛋白小体的形成是很重要的步骤。
(3)被检者的红细胞比积应先调至与正常相近水平。