1 概述
乙型肝炎核心抗原(hepatitis B core antigen,HBcAg)是单一多肽,分子量18848u。HBcAg在HBV感染中占有重要地位,他能反映血清中:Dane颗粒的存在及肝内HBV的复制,并可与其他的HBV血清学标志物起互相配合和互相补充的作用。只是由于其抗体具有很强的亲和力,能迅速地与血清中的HBcAg结合,形成免疫复合物,因而难以在血清中测得游离的HBcAg。
3 乙型肝炎核心抗原的医学检查
3.1 检查名称
3.2 分类
3.3 取材
3.4 乙型肝炎核心抗原的测定原理
待检血清经脱蛋白外壳剂处理后,与包被在固相载体表面的抗-HBc结合形成抗体-抗原复合物,加入酶标记抗-HBc,则形成抗体-抗原-酶标记抗体复合物,遇底物显色,其颜色的深浅与待检血清中HBcAg的含量成正比。
3.5 试剂
见商品试剂盒,包括:已包被固相载体板条、HRP-抗HBc、脱蛋白外壳剂(NP-40)等。
3.6 操作方法
将待测血清处理后,基本同HBsAg测定。待检血清的处理:取血清0.4ml,加生理盐水1.0ml,混匀后4000r/min离心20min,弃上清,加入抗-HBc 50μl,37℃孵育1h,移置4℃过夜,次日取出加NaCl 3ml,4000r/min离心30min,弃去上清,即可得到HBV免疫复合物,然后再重复用NaCl洗2次,目的是除去剩余的抗-HBc对实验的干扰。提取HBcAg将HBV颗粒进行裂解,在沉淀物中加入4%NP-40 100μl,并用玻棒搅碎沉淀物,置37℃孵育15min,即为处理后的待检血清。
3.7 正常值
阴性。
3.8 化验结果临床意义
HBcAg存在于含量高的血浆和肝组织中,主要存在于Dane颗粒中,血中测不出。