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一种提高组织DNA抽提得率的方法
一种提高组织DNA抽提得率的方法(pdf) 【摘要】目的采用常规酚-氯仿抽提法方法提取组织DNA,通过延长水浴时间提高提取DNA得率。方法各组设置不同的水浴时间,比较所提DNA得率。结果用酚-氯仿提取肝脏DNA,随着水浴时间的...
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5-1-8D环(D-loop)复制
在研究真核细胞内线粒体DNA的复制时,发现了DNA的D环复制。复制过程分为四个阶段。D环复制的特点是两条链的复制不是同步的。 1.H链首先合成:在复制起点处以L链为模板,合成─RNA引物,然后由DNA聚合酶γ催化合成一个500-...
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北京大学首席科学家PNAS新文章
...刊》(PNAS)上发表了题为“StructuralbasisforrecognitionofAT-richDNAbyunrelatedxenogeneicsilencingproteins”的研究论文,解析了原核细胞中的H-NS和Lsr2蛋白特异性靶向识别外源DNA序列AT富集区的结构机制。来自北京大学化学与分子工程学院的夏斌...
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非放射性标记物BrdU研究进展
溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)是DNA前体胸腺嘧啶核苷类似物,通过竞争掺入S期细胞单链 DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。BrdU与胸腺嘧啶竞争掺入的强度可能与细胞增殖异常有关,如肝癌细胞约11.6%的胸腺嘧啶被替代,...
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DNA“寄生虫”提高细菌抗生素抗性的机制
...Science》一篇文章报道说,细菌的“秘密”质粒——环“DNA寄生虫”(‘DNAparasites‘)可携带抗生素抗性基因,其所编码的蛋白提高抗生素环境中细菌的存活率,这种质粒是抗生素使用的一大障碍。质粒是30多年被发现的多种细菌...
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疟疾核酸免疫的研究进展
...一种有希望的基因治疗方法,带有病原体抗原基因的质粒DNA直接导入宿主细胞,可激发出针对编码抗原的特异性细胞免疫应答和/或体液免疫应答[4]。在短短的几年中核酸免疫已取得了长足的进展,本文就核酸免疫在疟疾疫苗研...
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麻疹病毒新型疫苗研究进展
...棉鼠中,疫苗诱导的阳转同样被抑制。在该动物模型中,DNA疫苗对阴性动物成功免疫,但在含有抗体的动物中同样受到抑制。相反,使用表达麻疹病毒H蛋白的重组VSV粘膜免疫棉鼠,即使在存在母体抗体的情况下,也能产生保护...
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海南岛黎族3个支系DYS199、Y-27H39位点多态性的研究ˇ(基金项目)
...)资助项目【摘要】目的探讨海南岛黎族不同支系在2个Y-DNA基因座的遗传多态与差异。方法采用PCR扩增DYS199、Y-27H39基因座,琼脂糖凝胶电泳及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果。结果黎族3个支系289个男性个体的DYS199位点均未发...
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线粒体DNA替代疗法引争议
科学家认为,线粒体DNA变体与许多普通人体状况有关联,包括神经退行性疾病、癌症和衰老等。上世纪90年代,法国科学家干扰了一只老鼠的线粒体,并观察其大脑将产生何种变化。线粒体能为大部分复杂细胞提供能量。结果发...
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Nature,PLoS获得分子生物学基础研究新成果
...。另外来自美国纽约西奈山医学院等处的研究人员公布了DNA聚合酶η的晶体结构,并解析了人类DNA聚合酶η的结构和功能,确定了人体DNA聚合酶η的催化区域的结构。DNA聚合酶η(Polη)是在DNA遭受内源和外界环境因子的攻击造成DNA损...
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海洋性贫血实验室检查有哪些表现?
...常;标准型α海洋性贫血α/β合成比例减少到0.7。 (6)DNA分析 用于海洋性贫血基因诊断的DNA分析方法主要有限制性内切酶酶谱、限制性片断长度多态性联锁分析、寡核苷酸探针杂交、聚合酶链反应等。 ①限制性内切酶...
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遗传学和化学方法可望破解红木鉴定难题
...国林产工业协会红木分会秘书长殷亚方基于分子遗传学的DNA分子标记技术和基于化学的稳定同位素分析技术是近年来逐渐发展起来的木材识别新技术。DNA分子标记技术多用于鉴定木材的“种”,而稳定同位素分析技术可鉴定木材...
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转基因小鼠肝癌细胞株的建立及生物学特性研究①
...的肝癌细胞株H22-mIFN-γ,对该细胞株的生长、形态结构、DNA含量及细胞周期的变化、γ-干扰素的分泌、细胞的免疫原性及致瘤性等生物学特性进行了研究。结果:发现该株细胞的生长、形态结构、DNA含量及细胞周期均无明显改变...
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H-2Kb基因转移诱导小鼠心肌移植免疫耐受
...培养基均购自Gibco公司。AMV逆转录酶购自Promega公司。PBR322DNA/HinfⅠMarker、pGEM-7zfHaeⅢDNAMarker、PCRmarkers购自华美生物工程公司。FITC标记抗小鼠H-2Kb单克隆抗体购自Pharmingen公司。 1.3 质粒pXN(N2-B19-H-2KbcDNA)和空载体N2 由美国...
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性别鉴定的方法
...子。其原理是带有X染色体的精子所含的去氧核糖核酸(DNA)较带Y染色体的精子为多,利用能够与精子头部DNA结合的荧光染色剂处理后,藉由产生的荧光量高低差异而加以分离筛选。目前已应用在体外受精系统中,虽然精子分...
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聚合酶链反应在幽门螺杆菌感染中的新进展
... 1 PCR原理 PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术,有关它的原理许多文献已有详细介绍,这里只作简述PCR的每次扩增循环包括三步,第1步为变性,在高温下把双链靶DNA拆开;第2步,在较低的温度下使引物与...
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抗乙型病毒性肝炎新药——阿德福韦酯
...2006年底ADV的一些基础和临床研究,表明ADV在ALT复常,HBV-DNA中位数水平较基线下降,HBV-DNA有效抑制,HBV-DNA阴转方面均疗效显著。不良反应相对较轻,耐药和变异株出现较少。【关键词】阿德福韦酯;乙型病毒性肝炎;药物评价...
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第二节 自身抗体的检测及临床意义
...种不同的ANA。 1.抗核蛋白抗体核蛋白抗原(DNP)由DNA和组蛋白组成。由于DNP抗原存在不溶性和可溶性两个部分,可分别产生相应的抗体。不溶性DNP抗体通常不完全被DNA和组蛋白所吸收,它是形成狼疮细胞的因子;可溶性抗...
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DNA疫苗的相关研究进展
摘要:DNA疫苗又称为核酸疫苗,是20世纪90年代初发展起来的一种全新疫苗,具有能够激发机体体液和细胞免疫反应,核酸疫苗因高效、持久、广谱、简便、廉价、无致病性等特点,被作为一种新型的疫苗而得到广泛的研究和应...
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两株HIV疫苗异军突起
...原毒株:HIV-1CRF-07株,目前中国流行最广的HIV毒株。重组DNA抗原成分:gag、pol、env和nef基因。Gag基因:即组特异性抗原基因,编码分子量为55KD的前体蛋白(P55),由未拼接的病毒mRNA表达。P55经病毒蛋白酶切割,由N端至C端形成P17...
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川崎病患者外周血淋巴细胞凋亡减少的初探
...体外培养不同时间的凋亡进行计数凋亡细胞百分率和片段DNA分析。结果:KD患者凋亡细胞百分率和片段DNA出现时间较正常对照降低(P<0.001)和延迟,PBMC体外培养产生IL-6水平较正常对照显著升高(P<0.001);加抗IL-6单抗培养或静脉注...
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原发性肝癌组织中螺杆菌相关基因的检测
...作用机制奠定基础。现报告如下。1材料与方法1.1材料TaqDNA聚合酶、dNTP、MgCl2等PCR反应试剂购自上海生工生物工程服务有限公司;CSPD、DNAMarkerⅧ、地高辛标记检测试剂盒(Cat.No.1362372)购于德国罗氏公司;Southern杂交用胶片购自柯...
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北京大学生物化学试题(硕士)1999年,1997年,1996年,1992年,1991年,1989年,1988年
...性质,可用的方法有( )。 30,在同一细胞中,RNA和DNA杂交性质是( )。 31,DNA的Maxam-Gilbert化学法序列分析对底物的要求是( )。 32,单链DNA分子溶液形成双链的复性过程是( )级反应。 33,真核细胞中的RNA聚合...
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神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探①
...探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法:采用DNA凝胶电泳,流式细胞术,光镜及RT-PCR等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因bcl-2,c-mycmRNA表达分析。结果:神经酰胺(C2-ceramide),肿瘤坏死因子(TNFα)及长春新碱(Vincristine)均可不...
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固相PF18-3单抗促进亚适量ConA诱导的胸腺细胞活化后凋亡
...相单抗PF18-3共育后细胞活化过程中3H-TdR掺入、细胞周期及DNA亚二倍体变化、早期活化及凋亡分子的表达。结果 固相单抗PF18-3有弱的促胸腺细胞3H-TdR掺入和促进CD25的表达,当有亚适量ConA存在时作用更明显。与对照组相比,PF18-3...
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江浙沪地区汉族人群9个STR座位遗传多态性研究
...心序列串联重复而成,是一种广泛存在于人类基因组中的DNA片段。据估计,在人类基因组中,每20kb就含有一个STR座位。研究表明,STR座位具有高度遗传多态性,且具有扩增效率高,判型准确,并适用于微量生物检材的DNA分型技...
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MolecularmechanismsofenhancedrenalcelldivisioninprotectionagainstS-1,2-dichlorovinyl-L-cysteine-inducedacuterenalfailureanddeath
...ction).TheobjectiveofthisstudywastodeterminecorrelationamongextentofS-phaseDNAsynthesis,activationoftranscriptionfactors,expressionofG1/Scyclins,cyclin-dependentkinases(CDKs),andCDKinhibitorsdownstreamofERK1/2followingDCVC-inducedARFinautoprotection.Administrationofthelethaldosealonecausedageneraldo...
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中美科学家在天然DNA骨架中发现硫元素
有一种被用作药物的DNA修饰物,原本一直是人类在实验室中合成的,现在,中美科学家共同发现,原来细菌早就会干这件事——五种酶合力,能将硫掺入到DNA骨架中。这种被称为磷硫酰化的DNA修饰,是迄今在天然DNA骨架上发现的...
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第十六章 DNA的生物合成--第一节 DNA的复制
第十六章 DNA的生物合成(TheBiosynthesisofDNA) 脱氧核糖核酸(DNA)是生物界遗传的主要物质基础。生物有机体的遗传特征以密码(code)的形式编码在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺序-即遗传信息,在细胞分裂前通过DNA的复制(R...
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逆转录病毒载体介导的人白细胞介素10在大鼠心肌细胞的表达
...(PCR)及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染大鼠心肌细胞DNA及mRNA,应用ELISA测定hIL-10在心肌细胞的表达。结果:外源性hIL-10基因已整合到心肌细胞染色体DNA并有效地转录和翻译,表达水平最高达1755ng/(106cells*24h)。结论:外源性hIL...