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基础篇--1．幽门螺杆菌的分子生物学研究--幽门螺杆菌的分子生物学研究现状
...rall等用斑点杂交法评价了同位素与非同位素标记Hp全基因探针的实用性。Mortomi等通过DNA-RNA杂交方法，用人工合成的Hp特异性寡核苷酸探针，同16SrRNA序列互补，证实这种探针比较敏感，可以检出少至5000个～10000个Hp。 近年来...
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临床常见腹泻致病菌的快速鉴定方法研究进展
...方法,其不仅具有普通PCR的高灵敏性,而且由于应用了荧光探针,可以通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果,所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精确性。2009年,徐德顺等[13]利用特异性的Ta...
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多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌
...性基因invA和ssaR基因，分别设计一对引物和改良分子信标探针，用同色荧光标记，用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列，设计引物和改良分子信标探针，加入沙门菌检测体系中，建立三重实时PCR-改良分子信标...
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第二节 核酸分子杂交法
...链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组或质粒DNA。探针以放射核素或非放射性核素标记，以利于杂交信号的检测。 所谓杂交（hydridization）指两个以上的分子因具有...
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EMB基因330密码子分子DNA探针设计及荧光检测
...的针对结核杆菌耐乙胺丁醇embB330密码子位点设计分子DNA探针，尝试运用荧光分光光度计直接观测液相中分子DNA探针与embB330密码子扩增产物杂交后的荧光信号，从而检出该位点突变。方法运用软件Beacondesigner设计embB基因包含330密...
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霍乱弧菌中存在不含霍乱毒素基因的噬菌体CTXΦ基因组
...CTXΦ基因组中的ctxA、ctxB、zot、ace、cep和RS1结构基因制备探针，对ctxAB-菌株染色体作Southernblot检测，并用PCR方法检测CTXΦ的感染受体毒素共调菌毛（Tcp）的tcpA基因。结果 发现有4株分离自河水的霍乱毒素基因阴性EVC菌株仍含有溶...
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完全自组装DNA纳米结构基因检测平台
...查数千个基因的突变或者发现疾病的线索。然而，由于DNA探针是固定在微阵列芯片的固体表面上的，靶标寻找到探针是一个缓慢的过程。而且，很难把探针之间的距离控制在纳米精度上。“在这项研究中，我们开发了一种水溶性...
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美国药典对现有残余DNA检测技术的评价
...ybridization-based）：在这种方法中，根据宿主DNA序列设计DNA探针用于测定产品中配对DNA的数量。双链DNA被变性成单链后固定在尼龙膜或硝化纤维膜上，DNA探针被放射或荧光随机掺入标记以后，与膜上固定的样品宿主DNA杂交结合，并...
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溶组织内阿米巴病
...体滴度的消长水平可提示地区发病情况。单克隆抗体和DNA探针杂交技术的应用为探测宿主血液和排泄物中的病原物质提供了特异、灵敏并能抗干扰的示踪工具。应用单克隆抗体检测粪便、脓液内虫源抗原及DNA探针鉴定粪内虫种均...
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分子杂交技术
...称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。 杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被...
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分析单细胞内基因表达的新途径
...中发生突变的情况，或者发现疾病的线索。然而，因为DNA探针固定在微阵列芯片的固体表面上，所以靶标寻找到探针是一个缓慢的过程。此外，很难把探针之间的距离控制在纳米精度上。美国亚利桑那州立大学生物设计研究所的...
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樊春海谈DNA纳米基因芯片：体现了现代科技的交叉性
...基因检测的效率？樊春海：在这块基因芯片上布满了基因探针，基因探针就是一小段单链DNA，可以用来检测疾病，以及发现与遗传病、传染病相关的一些情况。基因芯片借用了计算机芯片的概念，就是将众多基因探针集成到一块...
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敌敌畏抗性淡色库蚊酯酶B1、A2探针制备及应用
摘要：目的制备敌敌畏抗性品系淡色库蚊酯酶B1、A2探针，并应用于抗性品系及敏感品系的检测。方法分别设计酯酶B1、A2上下游引物，5’端地高辛标记，PCR法制备DNA探针，分子杂交检测各个品系淡色库蚊。结果摸索出合适的区分...
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常用的分子生物学基本技术简介
...）可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针（probe）,待测核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的，能与特定的核...
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幽门螺杆菌cagA基因探针的制备与临床应用
幽门螺杆菌cagA基因探针的制备与临床应用中华微生物学和免疫学杂志1999年第3期第19卷免疫检测作者：徐义辉 糜克永 龙焱华单位：徐义辉糜克永 430071武汉 中国科学院武汉病毒研究所；龙焱华 武汉市第三人民医院关键词...
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利用分子探针检测DNA损伤的新方法
...进展[3]。据报道，他们开发了一种基于人工合成核苷分子探针检测DNA损伤的新颖方法，该工作有望开辟一系列新型分子探针用于DNA化学修饰研究及损伤检测的新途径。致癌物质与DNA所形成加合物的结构，及该加合物在DNA链上的分...
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分子生物学检测在HP感染中的应用
...herall等于1988年最早用斑点膜杂交法将幽门螺杆菌HP基因组探针用于HP检测，并与32P、生物素、光敏生物素及半抗原磺基基团四种标记探针进行比较，结果显示：32P、生物素及磺基标记探针的灵敏度为100pg靶DNA，相当于5×104个细菌...
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第五节 寡核苷酸探针的制备
第五节 寡核苷酸探针的制备 利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），这类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行...
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核酸杂交
...条件下电泳分离，然后转印并交联固定。 （2）制备探针：探针是指一段能和待检测核酸分子依碱基配对原则而结合的核酸片段。它可以是一段DNA、RNA或合成的寡核苷酸。在核酸杂交实验中，探针需要被标记上可直接检测的...
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第十九章 核酸（基因）分子探针--第一节 概述
第十九章 核酸（基因）分子探针第一节 概述 从化学和生物学的意义上理解，探针是一种已知特异性的分子，它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受...
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突破性DNA单碱基突变检测技术
...以及华盛顿大学电子工程学博士生SherryChen设计出了一些探针，它们可以辨认出靶DNA片段上的单碱基对突变。借助这些探针，研究人员能够更详细地寻找长达200个碱基对的序列中的变异，而当前的方法只能检测20个碱基对DNA片段中...
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第一节 原位杂交组织化学概述
...DNA的构建成功，核酸自动合成仪的诞生，大大丰富了核酸探针的来源，新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其作用方式可大致分为固相杂交和液相杂交两种：液相杂交是指参加反应的两条核酸链都游离在溶液中，而固相杂...
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基因传感器简介
...探头表面上的已知核苷酸序列的单链DNA分子（也称为ssDNA探针），和另一条互补的ssDNA分子（也称为目标DNA）杂交，形成的双链DNA（dsDNA）会表现出一定的物理信号，最后由换能器反应出来。 目前研究和开发的基因传感器从信...
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待检测样品制备
...物处理。从血液或活组织中获取的DNA/mRNA样品在标记成为探针以前必须扩增以提高阅读灵敏度，但这一过程操作起来却有一定的难度。比如在一个癌细胞中有成千上万个正常基因的干扰，杂合癌基因的检测和对它的高效、特异地...
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第四节 遗传病与肿瘤的基因诊断
... 一、分离基因进行结构分析 利用DNA离体转化，制备探针，制备基因文库进行筛检，最后鉴定载体中插入DNA片段的特性等一系列技术，可以设法分离出目的基因或某一特定的DNA顺序。然后通过DNA核苷酸顺序分析可以弄清楚某...
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待检测样品制备
...物处理。从血液或活组织中获取的DNA/mRNA样品在标记成为探针以前必须扩增以提高阅读灵敏度，但这一过程操作起来却有一定的难度。比如在一个癌细胞中有成千上万个正常基因的干扰，杂合癌基因的检测和对它的高效、特异地...
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待检测样品制备
...物处理。从血液或活组织中获取的DNA/mRNA样品在标记成为探针以前必须扩增以提高阅读灵敏度，但这一过程操作起来却有一定的难度。比如在一个癌细胞中有成千上万个正常基因的干扰，杂合癌基因的检测和对它的高效、特异地...
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实时荧光定量PCR在乙型肝炎诊断中的临床价值探讨
...方法 1.2.1主要试剂FQ-PCR试剂盒由上海复星公司提供，探针序列在S基因区，上游引物5′-CTCGGATCCTTGTGACTTCTTTCCTG-3′；下游引物5′-CGGAGGCGAGGGAGTTCTTCTTCT-3′；乙肝病毒标志物（HBVM）五项试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供；Pre-...
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第四节 非放射性标记的核酸探针
第四节 非放射性标记的核酸探针 放射性标记核酸探针在使用中的限制，促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展，在许多方面已代替放射性标记，推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术，...
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第二十三章 基因诊断与基因治疗--第一节 基因诊断
...条件下电泳分离，然后转印并交联固定。 （2）制备探针：探针是指一段能和待检测核酸分子依碱基配对原则而结合的核酸片段。它可以是一段DNA、RNA或合成的寡核苷酸。在核酸杂交实验中，探针需要被标记上可直接检测的...