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层析技术(Layer-analisetechnique)
离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相，以蛋白质等样品为移动相，分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 （一）原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基...
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DEAE－纤维素与Sephadex1比较
项目DEAE纤维素Sephadex交换量小较大非特异性吸附较大小分离纯度较好好分离时间较粗较长应用范围较窄较宽预处理繁琐方便作者：
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分离的血清与所需DEAE—纤维素量及其他条件的大致关系
血清样品量（ml）DEAE需用量（g）选层析柱规格（cm）选脱液量（ml）1~221×25100~150552×12200~30010102×20300~40020202×37400~800作者：
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IgG的分离与提纯
...的产物即为优球蛋白，Euglobin，含γ球蛋白)。10．过DEAE－纤维素层析柱。（装柱过程见层析技术）。以0.01Mol/LpH7.4PBS（0.03Mol/LNaCl）洗脱，收集洗脱液。也可采用SephadexG150或G200柱。11．蛋白质及其定量鉴定（见本章第八节）。12．Ig...
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商品DEAE—纤维素和CM纤维素的类型和特性
纤维素形状长度交换当量（毫克当量/克）蛋白质吸附容量（mg/g牛血清白蛋白）床体积（ml/g）pH6.0pH7.6DE-22改良纤维12~4001.0±0.14507.77.7DE-23改良纤维（除细粒）18~4004508.39.1DE-32微粒型（干）24~636606.06.7DE-52微粒型（湿）24~636606.06.3DE-11...
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第三节 动脉血管壁细胞间质成分的提取
...取 蛋白多糖具有可溶于4mol/L盐酸胍的性质，再经DEAE-纤维素层析除去其他杂质，非蛋白多糖与蛋白多糖用不同浓度尿素可分段层析分开。 1．取动脉血管小心除去血管周围脂肪组织和纤维膜，用冷0.5mol/lPBSpH7.8洗涤，2kr/min...
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银耳孢子碱提多糖的提取、分离及其结构分析
...水难溶性组分采用不同浓度的氢氧化碱液梯度提取，DEAE-纤维素分离和纯化，纯化后的组分分别进行分子量测定，红外光谱分析，水解并乙酰化后进行气相色谱分析确定单糖组成及摩尔比。结果从银耳孢子发酵物中分离得到四个...
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葡萄球菌肠毒素C的纯化与标准参考品的制备研究
...截留浓缩。使SEC原液浓缩约10倍（336800ng/ml）；再通过DEAE-纤维素柱层析使SEC纯度达到46.1％。最后通过SephadexG-75分子筛过柱使SEC纯度达到96.1％。经SDS-PAGE凝胶电泳上呈单一条带。经与标准分子量蛋白的条带比较，SEC的分子量约在28...
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免疫荧光非特异性染色的消除方法
...ephadexG-50装柱，即可过滤2～3.5ml荧光抗体。 （四）DEAE纤维素柱层析法 标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下： DEAE-纤维素柱的装柱，洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所...
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楮头红多糖的分离纯化与生物活性检验*
...除小分子物质，冷冻干燥得楮头红多糖粗品；采用DEAE-52纤维素柱层析和SephadexG-200凝胶柱层析进行分离纯化；用TBA法考察多糖的抗脂质过氧化作用；采用CCl4急性肝损伤模型，测定其血清中AST变化。结论获得一个楮头红多糖组分。...
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枸杞制药废渣中粗多糖的提取纯化与相关成分分析
...渣粗多糖（总多糖），收率为4.1%。 枸杞总多糖经DEAE纤维素（OH-型）柱层析次用水、0.01～0.1mol.L-1NaHCO3,0.01～1 mol.L-1NaOH水溶液洗脱（硫酸-苯酚法进行监测），其中用水洗脱部分得到的洗脱曲线为一个宽峰且有裂分，用其...
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第五节 非特异性染色的消除方法
...ephadexG-50装柱，即可过滤2～3.5ml荧光抗体。 （四）DEAE纤维素柱层析法 标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下： DEAE-纤维素柱的装柱，洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所...
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Epstein-Barr病毒壳抗原gp125的纯化和应用
...建立 将纯化的抗原以0.2μg/条开始倍比稀释吸附于硝基纤维素膜上用于检测，阳性血清的抗体特异性地与纤维膜上的抗原结合，呈现一条红色条带，阴性血清孵育的抗原条带呈无色；在0.05μg/条的抗原量时仍可检测出阳性血清。...
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离子交换剂的类型与特点
交换剂名称（纤维素）作用基团特点阴离子交换剂二乙氨基乙基DEAE+-O-C2H4N+(C2H5)2H最常用在pH8.6以下三乙氨基乙基DEAE+-O-C2H4N+(C2H5)2H氨乙基AE+-O-C2H4-NH2胍乙基强碱性、极高pH仍有效阳离子交换剂羧甲基CM—-O-CH2-COO—最常用在pH4以上磷...
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人凝血酶原复合物分离纯化技术推陈出新
...浆中分离纯化出白蛋白、丙种球蛋白、α1－抗胰蛋白酶、纤维蛋白原和凝血因子。EBA技术适合处理组分复杂、料液黏度大、洗涤困难的物料。▲我国现状：质量标准低于欧洲工艺水平有待提高关于PCC的质量标准，《中国药典》200...
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DEAE-SephadexA-50纯化免疫球蛋白F(ab’)2的研究
【摘要】目的采用DEAE-SephadexA-50纯化,提高破伤风抗毒素免疫球蛋白F(ab’)2的纯度。方法破伤风免疫血浆用胃蛋白酶消化、硫酸铵盐析、明矾提纯后的免疫球蛋白F(ab’)2,经DEAE-SephadexA-50纯化并进行检测。结果经上述方法消化2h,95%以...
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乙型肝炎病毒e抗原的纯化及其在人血清抗体检测中的应用
...色。 1.6 免疫条法 将纯化的抗原经狭缝打点在硝基纤维素膜上，每孔50μl，用含5％脱脂奶的TBS缓冲液4℃封闭过夜，室温干燥后，切成约长1cm宽0.5cm的小条密封，-20℃冻存，使用时先后加入待检血清及酶标抗体，室温浮育1...
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猪血小板衍生生长因子的提取和纯化
....7×104Bq。培养结束后用多头细胞收集仪将细胞收集于玻璃纤维纸上，10%三氯醋酸、无水乙醇、乙醚洗涤，干燥后置于液闪瓶中，每瓶加入5ml闪烁液（PPO4g，PPOP0.4g，二甲苯1000ml）。在LS6500型闪烁计数仪（Beckman）上进行计数，结果...
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猪血小板衍生生长因子的提取和纯化
....7×104Bq。培养结束后用多头细胞收集仪将细胞收集于玻璃纤维纸上，10%三氯醋酸、无水乙醇、乙醚洗涤，干燥后置于液闪瓶中，每瓶加入5ml闪烁液（PPO4g，PPOP0.4g，二甲苯1000ml）。在LS6500型闪烁计数仪（Beckman）上进行计数，结果...
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灵芝多糖的提取
...，一般要经过纯化。 (3)多糖的纯化，去蛋白质和deae纤维素柱层析。去蛋白质一般采用sevag法：加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止，且要重复处理2-3...
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降胆葡胺DEAE
药物名称降胆葡胺DEAE药物别名降脂3号树脂，英文名称Saphadex说 明块型：4g功用作用同消胆胺、用于Ⅱ型高脂血症。与氯贝丁酯有协同作用，可合用用法用量口服：1日12～16g分3～4次注意事项同考来烯胺作者：
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离子交换色谱法教程
Sober和Peterson于1956年首次将离子交换基团结合到纤维素上，制成了离子交换纤维素，成功地应用于蛋白质的分离。从此使生物大分子的分级分离方法取得了迅速的发展。离子交换基团不但可结合到纤维上，还可结合到交联葡聚糖...
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siRNA的转染
...认siRNA的大小和纯度。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RN...
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凝胶层析技术
...icro;）。颗粒越细，流速越慢，分离效果越好。表 DEAE－纤维素与Sephadex1比较项目DEAE纤维素Sephadex交换量小较大非特异性吸附较大小分离纯度较好好分离时间较粗较长应用范围较窄较宽预处理繁琐方便（三）试验方法1．凝胶的...
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多数刺梨多糖组分具神经营养活性
...刺梨多糖组分在神经营养方面的作用，研究人员采用DEAE-纤维素柱色谱及SepharosecL-6B凝胶柱色谱对刺梨粗多糖进行分离纯化，得到RRTP-1~RRTP-8共8个多糖组分。凝胶柱色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定纯度，采用大鼠嗜铬细胞瘤PC12细...
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IgA的分离与提纯
（一）材料与试剂配制1．DEAE52纤维素2．0.10Mol/LZnSO4液ZnSO4·7H2O2.88g加水至1000.00ml3．饱和硫酸铵溶液4．10％EDTA—Na5．SephadexG2006．0.01Mol/LpH7.4PB液7．0.10Mol/LpH6.4PB液8．血清（二）操作方法1．取血清加等量的0.1Mol/LZnSO4液，调pH至7.0，...
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常用交联葡聚糖的类型与特性
类型性能离子基因反离子总交换容量（毫克当量/g）DEAE-sephadexA-25弱碱性、阴离子交换剂DEAE+Cl—3.5±0.5DEAE-sephadexA-50QAE-sephadex-25弱碱性、阴离子交换剂QAE+Cl—3.0±0.4QAE-sephadexA-50CM-A-sephadex25弱碱性、阳离子交换剂CM—Na+4.5±0.5CM-sephadex...
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猴菇菌水溶性多糖化学结构研究
...的研究猴菇菌丝体的水溶性多糖化学结构。方法采用DEAE纤维素和sephadex柱分离纯化，通过理化常数、化学和光谱分析研究其化学结构特征。结果从猴菇菌丝体中分离得到5个多糖均一体，其成分HEPb分子量5.3×104，为以葡萄糖为主...
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阴沟肠杆菌及其糖蛋白组分的抑瘤效应
...步将该菌菌体经热水抽提、季铵盐沉淀、乙醇沉淀、DEAE-纤维素柱分离纯化。得到F1、F2、F3、F4四种主要成分。采用形态观察法将对数生长期的肝癌细胞QGY7703胰酶消化调整细胞数为2×105个/毫升，以2倍比稀释待测F1、F2、F3、F4组分...
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第一节 抗原的制备
...菌酶，37℃，保温10min，细胞就破坏了。此外，蜗牛酶、纤维素酶也被选作破碎细菌细胞之用。 （3）表面活性剂处理法：较常用的有十二烷基磺酸钠、氯化十二烷基吡啶、去氧胆酸钠等。 （三）抗原的提取 提取、抽...