血清已糖 2012年03月07日修订版

BY banlang

心气虚,则脉细;肺气虚,则皮寒;肝气虚,则气少;肾气虚,则泄利前后;脾气虚,则饮食不入。

概述

糖原也属于一种多糖,但其仅由葡萄糖构成。此外,人体内还存在少量果糖、乳糖、木糖、已糖等。

血清已糖医学检查

分类

血液生化检查、糖类测定

原理

在已糖激酶催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸(6-GP),同时使NADP还原成NADPH。反应式如下:

根据反应方程式,NADPH的生成速率与已糖浓度呈正比,在波长340nm监测吸光度升高速率,计算血清中已糖浓度。

试剂

(1)酶混合试剂的成分与浓度:

三乙醇胺盐酸

缓冲液(pH7.5)  50mmol/L

MgSO4          2mmol/L

ATP            2.0mmol/L

NADP          2.0mmol/L

HK             ≥1500U/L

G6PD           2500U/L

根据试剂盒说明书复溶后,混合配制成酶试剂,置棕色瓶中放冰箱保存,约可稳定7天。

(2)5mmol/L已糖标准应用液:见GOD法。

操作方法

(1)速率法测定(以半自动分析仪为例):

①主要参数:

系数      8.2

孵育时间  30s

监测时间  60s

波长      340nm

吸样量    0.5ml

温度      37℃

②加样:37℃预温酶混合试剂1000μl,加血清20μl,立即吸入自动分析仪,监测吸光度升高速率(△A/min)。

③计算:

(2)终点法测定:取16mm×100mm试管,按表1编号与操作。

以上各管充分混匀,在37℃水浴,准确放置10min,分光光度计波长340nm、比色杯光径10mm,用蒸馏水调零,分别读取各管吸光度(Au、Ac、As、Ab)。

附注:

(1)已糖激酶方法的特异性比葡萄糖氧化酶法高,是目前公认为测定血糖的参考方法,适用于自动分析仪。轻度溶血、脂血、黄疸、维生素C、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不干扰本法测定。因为从红细胞释放出的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP,故干扰本法测定。

(2)虽然根据NADPH的摩尔吸光度可以直接计算血清葡萄糖浓度(如Boehringer、Roche等试剂盒),但建议最好同时测定标准管和空白管(蒸馏水代替血清)。此时计算公式应为:

正常值

6.74±0.07mmol/L(121.5±1.3mg/dl)。

临床意义

升高:肝硬化、慢性肝炎。

相关疾病

肝硬化

特别提示:本站内容仅供初步参考,难免存在疏漏、错误等情况,请您核实后再引用。对于用药、诊疗等医学专业内容,建议您直接咨询医生,以免错误用药或延误病情,本站内容不构成对您的任何建议、指导。