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TNF-α的合成分泌机制不同于一般的分泌型蛋白
...疫学教研室关键词:肿瘤坏死因子;体外转录翻译系统;信号肽类 【摘要】 目的 拟借助微粒体膜和体外转录翻译系统来研究分泌型TNFα(S-TNF-α)的产生机制及S-TNF-α和跨膜型TNFα(TM-TNF-α)的关系。方法 首先将分子量为17×10...
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百日咳毒素S1亚单位缺失分子的构建及其在重组杆状病毒中的表达①
... 150086)关键词:百日咳毒素;S1亚单位;重组杆状病毒;信号肽;疏水区 摘 要:目的:为探明羧基端疏水区对百日咳毒素S1亚单位分泌性的影响,试图构建缺失羧基端疏水区的S1亚单位。方法:应用PCR技术构建了6种不同信...
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人CEA-EK-hBD2融合基因及表达载体的构建
【摘要】目的将人癌胚抗原(CEA)分泌信号肽基因片段与人防卫素2(hBD-2)抗菌肽基因片段组成为一个融合基因,并构建该融合基因的拟转录病毒表达载体。方法采用PCR法等方法将CEA分泌信号肽、肠激酶(EK)识别位点序列、上...
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百日咳毒素S1亚单位的分子修饰及在重组杆状病毒中的表达
...虫卵细胞0.18~1.93μg或每只昆虫幼虫0.46~4.98mg之间。天然信号肽和HA信号肽均可完整表达,但后者的切割效率(61%~81%)比前者(16%~19%)更高。所有带信号肽的S1亚单位均呈异质性表达(双带)。结论:重组S1亚单位的表达是高效和正确...
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第三节 蛋白质合成后的分泌及加工修饰
...端都具有大约15-30个以疏水氨基酸为主的N端信号序列或称信号肽。信号肽的疏水段能形成一段α螺旋结构。在信号序列之后的一段氨基酸残基也能形成一段α螺旋,两段α螺旋以反平行方式组成一个发夹结构,很容易进入内膜的脂...
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小鼠趋化因子CXCL10真核表达载体的构建
...小鼠趋化因子CXCL10的cDNA,并加上人单核细胞趋化蛋白1的信号肽基因,将其克隆到Pucm-T载体,经酶切及测序鉴定,进而构建CXCL10重组真核表达载体。采用脂质体法体外转染COS-7真核细胞,经Westernblot和趋化指数检测,转染细胞能够...
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研究生入学考试生物化学经典题目
...现象出现?举出三种能引起蛋白质变性的试剂 3简介信号肽及识别信号肽的信号识别体的结构特征? 第二部分酶 4简述酶活性调节方式,这些方式在代谢调节上有何不同及在代谢调节上的意义 5什么是核酶(ribozyme...
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第四章 载脂蛋白基因结构及其基因型--第一节 载脂蛋白基因结构
...向mRNA至核糖体合成蛋白质的信号序列;第二个区域编码信号肽、前肽以及成熟蛋白质的部分氨基酸;第三个区域除编码成熟蛋白质的氨基酸外,还含有终止翻译以及添加聚腺苷酸的信号。并非每个基因所含的内含子与外显子数...
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6-3内质网
...验,提出了信号假说(Signalhypothesis),认为蛋白质上的信号肽,指导蛋白质转至内质网上合成。Blobel因此项发现获1999年诺贝尔生理医学奖。 蛋白质转入内质网合成至少涉及5种成分: ①信号肽(signalpeptide),是引导新...
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Fas和β-雌二醇受体融合基因在COS-7细胞中的表达
...膜区和胞浆区的mFas基因。P2上设计一个BstXI位点,以与hFas信号肽之后的单酶切位点BstXI连接,获得带信号肽的跨膜区和胞浆区SpmFas基因。另外设计两条引物P4、P5扩增人β-雌二醇受体的激素结合结构域。扩增基因均经DNA序列分析得...
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中国学者PLoSBiology挑战传统观点
...现,每个蛋白的年龄选择信号都定位于调控细胞器输入的信号肽中,他们还找到了一种信号肽结构域,这种结构域对于蛋白靶向老化的叶绿体是必需的。“我们知道,信号肽特异性的一种细胞器蛋白应该是有针对性的,就像地址...
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3-2-7真核生物的蛋白质生物合成
...前胰岛素原的M-末端有一段富含疏水氨基酸的肽段作为信号肽(signalpeptide),使前胰岛素原已成为胰岛素原。然后胰岛素原被运到高尔基复合体,切去C肽成熟的胰岛素,最终排出胞外。后来发现,几乎各种分泌蛋白质(如真核...
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致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因的克隆及序列分析
...+73位的错义突变对该菌毛的免疫学特性没有影响,保守的信号肽序列-16位出现同义突变,-3位缺失三联体密码使-1,-3位切割三联体由ANN变为ANV。结论 papA信号肽序列变异可能影响其正确的切割,致使132株(Mr为16.6×103)和J96株(Mr为1...
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单纯分泌型TNF-α真核表达质粒的构建及表达细胞株的建立
...研室,湖北武汉430030)关键词:分泌型TNF-α;膜型TNF-α;信号肽;基因表达 摘要:目的揭示膜结合的TNF-α前体(mTNF-α)与分泌型TNF-α(sTNF-α)生物学活性的不同。方法在克隆出mTNF-α基因的基础上,我们采用IL-2信号肽编码序列置换m-...
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分子修饰的重组百日咳毒素S1亚单位的生物学和免疫学特性
...明,rS1/3-4分子中至少存在4个疏水性区域:1个位于病毒信号肽内,1个在分子中间,2个位于羧基端(图3)。其中区域2和3分别含有19(201~219)和14(239~252)个氨基酸残基,其长度与疏水性强度足以将rS1分子嵌在细胞膜中。图3 rS1/3-4...
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1月3日《自然》杂志精选
...素”的结构被确定“早老素”(γ-分泌酶的催化成分)和信号肽肽酶是“膜内天冬氨酰蛋白酶”,主要调控真核细胞中重要的生物功能。γ-分泌酶最著名的基质是淀粉质前体蛋白,后者当被γ-分泌酶和β-分泌酶解理时会产生能形...
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植物病毒型药物载体靶向癌症细胞
...间”方面,都令人满意。研究人员通过在这种病毒上添加信号肽,使得这种病毒可以主动寻找特定细胞类型,如癌症细胞。这些信号肽同样作为病毒进入细胞卸载药物的信号。Franzen表示,通过尝试和比较多种类型的细胞靶向载...
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抗菌肽的研究进展
...D、Sarcotoxcin、家蝇素(Saoecin)等,这些前体,一般都含有一信号肽,C端有Gly信号肽与成熟肽间还有一段序列,所以这些前体应称为“前抗菌肽原”。抗菌肽以前体的形式被合成,像其他有前体的酶、激素一样,信号肽的存在有利...
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曹雪涛院士再发文章解析免疫新机制
...癌细胞、单核细胞和小鼠巨噬细胞中SCAMP5能促进钙调节的信号肽细胞因子分泌(包括CCL5,不包括IL-1β)。研究人员用亚细胞结构分离技术,免疫荧光共聚焦显微镜检测技术,囊泡免疫分离技术,对人SCAMP5研究发现其主要定位在...
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JBacteriol:绿脓杆菌最新研究进展两则
...的胞外c-di-GMP信号分子。发现影响绿脓杆菌毒力的两个I型信号肽酶LepB和PA1303近日,国际著名杂志《细菌学杂志》JournalofBacteriology上刊登了伦敦皇后玛丽大学的研究者的最新研究成果“PseudomonasaeruginosapossessestwoputativeType1signalpeptida...
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三、肿瘤坏死因子
...人TNF-α前体由233个氨基酸残基组成,含76个氨基酸残基的信号肽,切除信号肽后成熟型TNF-α为157氨基酸残基,非糖基化,第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。rHuTNF-α分子量为17kDa。小鼠TNF-α前体为235氨基酸残基,信号肽...
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洪明奇院士《Cell》解析肿瘤研究新发现
...人TNF-α前体由233个氨基酸残基组成,含76个氨基酸残基的信号肽,切除信号肽后成熟型TNF-α为157氨基酸残基,非糖基化,第69位和101位两个半形成分子内二硫键。rHuTNF-α分子量为17kDa。小鼠TNF-α前体为235氨基酸残基,信号肽79氨基...
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AMCase基因突变体克隆成功
...Si-gnalP3.0和TMHMMServerv.2.0等服务器对等电点、氨基酸组成、信号肽和跨膜结构等特征进行分析。 结果发现,所克隆的基因共编码473个氨基酸,分子量为51.93kD,等电点为4.73,与AMCase同源性达99.57%,同属18家族的几丁质酶成员,...
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人白细胞分化抗原CD59基因克隆及序列分析
...总RNA中扩增得到396bp片段,序列测定证实该片段为包括25aa信号肽在内的全部CD59编码序列。结论:表明CD59cDNA已成功地得到克隆。MolecularcloningandsequencingofhumanCD59BAIYun,JIANGMan,ZHUXi-Hua. DepartmentofImmunology,The3rdMilitaryMedicalUniversity,Chong...
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CD59融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达
...计了一对引物跨越成熟蛋白编码区,而不包括cDNA5‘端的信号肽区和3‘端的接锚信号肽编码区。上游引物5‘-CCCAAGCTTCTGCAGTGCTACAACTGTCC包含起始密码子ATG,外设HindⅢ酶切位点;下游引物5‘-CGCGGATCCTCATTAATTTTCAAGCTGTTCG包含两个串联的终...
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TRAIL及其受体与肝癌
...位于胞浆区,与TNF家族的其他成员无同源性,没有明显的信号肽。C末端位于细胞膜外,保守性较强,形成几个折叠结构,再形成典型的链夹心,即同源三聚体结构。TRAIL的细胞外部分降解后可形成可溶性TRAIL(sTRAIL)克隆。sTRAIL...
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生长因子的信号传递异常和恶性肿瘤的发生
...胞发生恶变。正常的酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)无信号肽序列,具有信号肽的aFGF可转化培养的细胞。转染含信号肽序列aFGFcDNA的传代细胞可在裸鼠形成肿瘤。 生长因子受体的结构异常可使细胞发生恶变。Fms癌基因编码...
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李学勇副部长参观广西工业生物技术研究中心
...费达4314万元。经过几年的攻关,研究团队现已完成带有信号肽及无信号肽的两种蔗糖酶基因的克隆,完成两个新型木糖异构酶在大肠杆菌中进行表达,筛选到耐高渗透压的酵母3株和耐高糖份的酵母7株;开展生物柴油生产用共性...
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免疫新分子的发现及其研究进展
...途径,以研究胞内蛋白相互作用见长。近年来建立的酵母信号肽捕获系统在选择性克隆含信号肽序列的新分子中具有潜在的优势。有人首先提出利用信号肽捕获克隆分泌蛋白和膜分子的概念[12]。酵母信号肽捕获系统适合于进...
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可溶性IL-6Rβ亚基突变体在CHO细胞中的表达及活性研究
...Ⅲ(FNⅢ)型结构单元。其中第二、三个FNⅢ型结构单元(信号肽除外的第103~299位氨基酸)与IL-6Rα的两个FNⅢ型结构,以及其他细胞因子受体的细胞因子结合区同源性很高,含4个保守的半胱氨酸残基和一个WSχWS,很可能就是细胞因子...