3 概述
人酸性鐵蛋白(acidic isoferitin,AIF)是鐵蛋白中的一種異構體。富含H亞基,等電點偏酸易成聚合體,其性質不同於其他鐵蛋白,有不同的抗原成分。一般的鐵蛋白試劑盒均是針對偏鹼性的肝脾鐵蛋白,而AIP主要存在於肝癌組織,心肌細胞和嗜中性顆粒細胞中,提示AIF可作爲腫瘤標誌物。由於血清中的AIF蛋白合成後糖基化修飾較完全,而心肌梗死等使細胞破裂釋放到血液中的組織,AIF糖基化不完全,血循環對其清除速度極快,不干擾血清AIF的測定。
4 人酸性鐵蛋白的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 人酸性鐵蛋白的測定原理
血清鐵蛋蛋白放免測定採用非平衡程序加樣法。標準品/待測樣品中鐵蛋白與抗體在適當溫度下預先反應形成複合物,然後加入地125I-鐵蛋白繼續進行溫育,使非標誌的鐵蛋白有較多與抗體結合機率,以提高方法靈敏度,最後用快速雙抗體(以聚乙二醇作促沉澱劑)法分離結合狀態及遊離狀態的125I-鐵蛋白。
4.5 試劑
(1)125I-鐵蛋白:1瓶(2ml),使用前加入溫育液20ml,混勻後使用。
(2)鐵蛋白標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別爲5、20、50、100、200,500μg/L,可直接用於實驗。
(3)抗血清:1瓶(22ml),直接用於實驗。
(4)第二抗體:2瓶,凍幹品,使用前每瓶加水6ml復原。放置10min,待充分溶解後使用。
(5)聚乙二醇(PEG):1瓶(11ml),可直接用於測定。
(6)溫育液:1瓶(22ml),可直接用於測定。
(7)質控血清:1瓶(1.0ml),鐵蛋白含量爲7μg/L,能直接用於實驗。
4.6 操作方法
嚴格按下表(表1)操作:
4.7 正常值
血清 男性:154μg/L;女性:81.3μg/L。
4.8 化驗結果臨牀意義
肝癌的血清學診斷主要應用AFP,由於肝癌患者AFP陰性和低水平增高佔有一定的比例,AIF的測定對肝癌的診斷有一定輔助作用。據張滿達報道,肝癌陽性率爲75.9%、遷延性乙肝爲17.2%、肝硬化爲6.0%、急性肝炎2%,說明AIF對肝癌有一定的特異性。對肝癌的診斷是一項有意義的指標。
4.9 附註
(1)本方法採用人心肌AIF作抗原,AIF放免法對AFP和CEA無交叉反應,對鐵蛋白有21.9%交叉反應。
(2)試劑盒要保存在2~8℃,但應防止凍結。
(3)試劑及待測樣品需放置於室溫下達到平衡,並充分混勻方可使用。
(4)要嚴格控制反應時間。標準曲線、質控血清及待測樣品反應條件要一致。