3 概述
鉤端螺旋體病是由各種致病性螺旋體引起的人畜共患的自然疫源性疾病。致病性鉤端螺旋體的羣和血清型衆多,其羣特異性的化學組成爲類脂多糖複合物,型特異性的化學組成爲蛋白多糖複合物,不同型鉤端螺旋體的多糖組成有所差異,患者體內可產生相應抗體,檢查特異性抗體有助於本病的診斷。
5 檢查名稱
8 試劑
(1)熒光素標記抗人IgG。
(2)鉤端螺旋體抗原。可用4~5個血清型的鉤端螺旋體培養物等量混合。
(3)鉤端螺旋體抗原片製備。將鉤端螺旋體抗原用接種環取少量,塗於薄而清潔的載玻片上,每張玻片塗2排16點,自然乾燥後,在室溫中用丙酮固定5min備用。
9 操作方法
(1)用磷酸鹽緩衝鹽水(pH值7.2)將經56℃滅活30min的受檢血清倍比稀釋成1∶50~1∶400,共4個稀釋度。
(2)將各稀釋度的受檢血清分別滴加在抗原塗片的各點上,每張塗片可滴4份受檢血清。放溼盒內37℃作用30min。
(3)傾去玻片上殘留的血清。用磷酸鹽緩衝鹽水(pH值7.2)洗滌。
(4)加數滴熒光素標記的抗人IgG抗體,放37℃ 30min。
(5)同法洗滌,待幹。加緩衝甘油(pH值9.5)封固,用熒光顯微鏡檢查。
(6)結果判斷:
(3+)菌體稍膨脹,呈明亮的淡綠色熒光。
(2+)菌體清晰,呈明亮的淡綠色熒光。
(-)看不到菌體。
10 正常值
陰性。