鉤端螺旋體病補體結合試驗

化驗及醫學檢查 補體結合試驗 血清學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。

1 拼音

gōu duān luó xuán tǐ bìng bǔ tǐ jié hé shì yàn

2 英文參考

Leptospirosis complement fixation test

3 概述

鉤端螺旋體病是由各種致病性螺旋體引起的人畜共患的自然疫源性疾病。致病性鉤端螺旋體的羣和血清型衆多,其羣特異性的化學組成爲類脂多糖複合物,型特異性的化學組成爲蛋白多糖複合物,不同型鉤端螺旋體多糖組成有所差異,患者體內可產生相應抗體檢查特異性抗體有助於本病的診斷。

7 鉤端螺旋體病補體結合試驗的原理

鉤端螺旋體抗原與相應特異性抗體結合後,再加熒光素標記的抗人球蛋白抗體,在熒光顯微鏡下發出熒光。根據是否出現熒光,可知受檢血清中有無鉤端螺旋體特異性抗體存在。

8 試劑

(1)熒光素標記抗人IgG。

(2)鉤端螺旋體抗原。可用4~5個血清型的鉤端螺旋體培養物等量混合。

(3)鉤端螺旋體抗原片製備。將鉤端螺旋體抗原用接種環取少量,塗於薄而清潔的載玻片上,每張玻片塗2排16點,自然乾燥後,在室溫中用丙酮固定5min備用。

9 操作方法

(1)用磷酸鹽緩衝鹽水(pH值7.2)將經56℃滅活30min的受檢血清倍比稀釋成1∶50~1∶400,共4個稀釋度。

(2)將各稀釋度的受檢血清分別滴加抗原塗片的各點上,每張塗片可滴4份受檢血清。放溼盒內37℃作用30min。

(3)傾去玻片上殘留的血清。用磷酸鹽緩衝鹽水(pH值7.2)洗滌

(4)加數滴熒光素標記的抗人IgG抗體,放37℃ 30min。

(5)同法洗滌,待幹。加緩衝甘油pH值9.5)封固,用熒光顯微鏡檢查

(6)結果判斷

(3+)菌體稍膨脹,呈明亮的淡綠色熒光

(2+)菌體清晰,呈明亮的淡綠色熒光

(+)菌體能分辨清楚,但熒光亮度稍差。

(±)菌體模糊或形態不典型,亮度差。

(-)看不到菌體。

以(+)爲判斷終點,(±)和(-)判爲陰性

10 正常值

陰性

11 化驗結果臨牀意義

結果有助於臨牀診斷鉤端螺旋體病。1∶100或大於1∶100的血清稀釋度顯示間接熒光抗體染色陽性者,均可判爲陽性。如第2次採血測定效價呈4倍以上增長者,臨牀意義更大。

12 附註

製作抗原塗片要選用潔淨無油的玻片,塗片要薄而均勻。製備好的塗片,待自然乾燥後,通過火焰3次,再用丙酮固定,效果較好。

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