1 概述
甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)爲一直徑爲27~32nm的二十面體立體對稱圓球形顆粒,無包膜,核心爲單鏈正股RNA。HAV屬小RNA病毒科嗜肝病毒屬(hepatovirus)或嗜肝RNA病毒屬(heparnavirus)。HAV主要通過手-口途徑傳播,潛伏期15~50天,平均28天。病毒常在患者血清ALT升高前的5~6天就存在於患者的血液和糞便中。發病2~3周後,隨血清中特異抗體的產生,血清和糞便的傳染性就逐漸消失。HAV的實驗室診斷可進行抗原檢測。
2 別名
HAV-Ag;HAAg
3 甲型肝炎抗原的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 化驗取材
3.4 甲型肝炎抗原的測定原理
夾心ELISA法,即包被抗-HAV,加待檢血清,再加酶標記抗-HAV,加底物顯色,酶標儀測定OD值。若用硝酸纖維素膜(NC)代替聚苯乙烯板,即NG-EIA法,抗原的檢測可得到加強,能檢測到1ng的HAV蛋白,相當於1.5×104病毒顆粒。
3.5 試劑
國內有商品化試劑盒供應,內含抗μ鏈包被的反應板(條),HAV應用液,抗HAV-HRP標記物,以及抗HAV IgM陰、陽性對照血清,樣品稀釋液,洗滌液,底物液及終止液等試劑。
3.6 操作方法
應按試劑盒介紹進行檢測。一般試劑盒分兩類。
(1)三步法:本法操作步驟較多,檢測費時,有逐漸被二步法取代的趨勢。
①加稀釋樣品:在包被反應板(條)孔內加入1∶1000倍稀釋樣品100μl,每次實驗有陰、陽性對照,37℃保溫2h,洗板3次。
②加HAV:各孔加HAV 100μl,37℃ 1h後移至4℃過夜,洗板3次。
③加抗HAV-HRP:各孔加抗HAV-HRP 100μl,37℃保溫3h,洗板4次。
④顯色:各孔加入底物液100μl,37℃保溫15min。
⑤終止反應:各孔加入終止液50μl。
⑥結果判讀。
比色法:在酶標儀上以試劑空白校零點,測各孔在492nm光密度值,當大於或等於4爲陽性,低於4爲陰性。
(2)二步法操作:按上法加稀釋樣品保溫、洗滌後,同時各孔加HAV 50μl及抗HAV-HRP 50μl,混勻後37℃保溫1h,洗板4次,以後同上法顯色和判讀結果。
3.7 正常值
陰性。
3.8 化驗結果臨牀意義
陽性:急性甲型肝炎感染,發病前1~15天HAAg陽性爲70.6%~87.5%,病後1周陽性爲42.9%,1~2周陽性爲18.3%,半月以後少見陽性。
HAVAg存在於病人感染後10~20d的糞便中,一般在發病前1~15d從糞便中排出,臨牀上不易捕捉到。發病1周時陽性率42.9%,1~2周時爲18.3%,半個月後消失。因此,臨牀上較少用。如果HAVAg陽性,表示病人正在感染甲肝,爲急性期早期。