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抗血清
抗血清的种类:免疫血清种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。10年内效价不会明显降低。(三)亲和层析法提取特异性IgG将纯化抗原或粗制抗原(如是单价特异性则对抗原要求不高)交联Sepharose4B制成亲和层析柱,将抗血清过柱后洗去未结合的杂蛋白,再用硫氰酸钾洗脱,流出的是纯的特异性IgG抗体。
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免疫血清
抗血清的种类:免疫血清种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。10年内效价不会明显降低。(三)亲和层析法提取特异性IgG将纯化抗原或粗制抗原(如是单价特异性则对抗原要求不高)交联Sepharose4B制成亲和层析柱,将抗血清过柱后洗去未结合的杂蛋白,再用硫氰酸钾洗脱,流出的是纯的特异性IgG抗体。
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沉淀反应
概述:沉淀反应是一种血清学反应。将血清或纯化抗体混入约50℃的0.7%琼脂糖溶液中,注入小口径试管内,待凝固后,在凝胶中面加入抗原溶液,让抗原自由扩散入凝胶内,在抗原与抗体比例恰当位置形成沉淀环。ALB:白蛋白;免疫胶乳浊度测定法:在上述比浊法中,少量的小的抗原抗体复合物极难形成浊度,除非放置较长时间;
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乳糜微粒
⑥染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~
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载脂蛋白AⅡ
概述:载脂蛋白是血浆脂蛋白部分各类脂蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋白。6℃冰箱中可存放半年。④兔(或羊)抗人apoA-Ⅰ抗血清(效价不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。⑥染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~为了减少基质效应对浊度反应的影响,必须用定值血清作校准物。
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APOA-Ⅱ
概述:载脂蛋白是血浆脂蛋白部分各类脂蛋中均含有一种和几种不同特异性载脂蛋白。6℃冰箱中可存放半年。④兔(或羊)抗人apoA-Ⅰ抗血清(效价不低于1∶16)及apoB抗血清(效价不低于1∶32)。⑥染色:将琼脂糖胶膜平铺浸泡于染色液内20~为了减少基质效应对浊度反应的影响,必须用定值血清作校准物。
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载脂蛋白CⅠ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅠ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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ApoCⅠ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅠ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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ApoCⅢ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅢ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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载脂蛋白CⅢ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(ApoCⅢ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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载脂蛋白AⅠ
(2)火箭电泳法:火箭免疫电泳法是单向免疫扩散法的一种改进,通过应用直流电(稳压稳流)使抗原(apoAⅠ和B)在含有特异性抗体的琼脂糖凝胶中扩散,pH8.6时抗原向阳极移动,在泳动途中与凝胶中的抗体反应,逐渐形成类似火箭的沉淀峰。⑦脱色:用脱色液浸泡已染色的胶膜至火箭峰清晰,背景基本无色。
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唾液白蛋白
(5)抗血清:可用国内特异性好,亲和力强,效价高的抗血清,选择最适稀释度,用0.45μm微孔滤膜过滤。以已知含量参考血清作为标准抗原,用ICS手动或自动方式测出该成分的含量,使与校正卡上所列含量一致,然后分装4℃保存。④标本测定:所有体液皆可测定,一般血清标本可按反应管中最佳检测浓度稀释。
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唾液富组蛋白
亦可将无溶血、无乳糜的正常人混合标本样测出有关成份的含量后,略作调正,使与校正卡上含量一致,然后过滤分装,低温保存。(5)抗血清:可用国内特异性好,亲和力强,效价高的抗血清,选择最适稀释度,用0.45μm微孔滤膜过滤。现以免疫球蛋白G(IgG)为例。20mg/L之间,最适抗原中点浓度为2mg/L(指反应管中的终浓度)。
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RIA
概述:放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法,用于定量测定受检标本中的抗原。交叉反应率的测定方法为用与抗血清相应抗原及其类似物用同法进行测定,观察置换零标准管50%时的量。4.活性炭吸附法小分子游离抗原或半抗原被活性炭吸附,大分子复合物留在溶液中。
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放射免疫分析
概述:放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法,用于定量测定受检标本中的抗原。交叉反应率的测定方法为用与抗血清相应抗原及其类似物用同法进行测定,观察置换零标准管50%时的量。4.活性炭吸附法小分子游离抗原或半抗原被活性炭吸附,大分子复合物留在溶液中。
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血清免疫球蛋白M
加入最适稀释度抗血清,每管2.5ml。化验结果临床意义:(1)升高:巨球蛋白血症、系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎、硬皮病、急、慢性病毒性肝炎、胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、梅毒、黑热病、锥虫病、伤寒、弓形体病、乙型脑炎、单核细胞性白血病、霍奇金病等。
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血清免疫球蛋白A
概述:IgA占血清免疫球蛋白总量10%~冷却后,取去上层玻璃及模板,即得平整均匀的抗体琼脂板。加入最适稀释度抗血清,每管2.5ml。相关疾病:多发性骨髓瘤、系统性红斑狼疮、红斑狼疮、结节病、类风湿性关节炎、肝硬化、湿疹、风疹、单纯疱疹、弓形体病、重链病、肾病综合征、慢性淋巴细胞白血病、霍奇金病
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血清免疫球蛋白G
冷却后,取去上层玻璃及模板,即得平整均匀的抗体琼脂板。相关疾病:系统性红斑狼疮、红斑狼疮、类风湿性关节炎、硬皮病、干燥综合征、多发性骨髓瘤、肝硬化、麻风、传染性单核细胞增多症、疟疾、锥虫病、肉瘤、霍奇金病、过敏性紫癜、重链病、肾病综合征、恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病
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流感病毒抗体
概述:流行性感冒病毒(influenzavirus)分为甲、乙、丙3个型,甲型流感病毒可引起世界性大流行。(9)辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(SPA)或辣根过氧化物酶标记的马抗小鼠的IgG抗血清。当前人群中流行的甲、乙型流感病毒(阳性对照)。9孔分别加入0.1ml不同稀释度(一般1/200~
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精制抗狂犬病血清
类别生物制品。3.4采血指标血清效价在100IU/ml以上。12g小白鼠30只,分成5组,每组6只,用经37℃作用的10-7至10-3病毒悬液接种小白鼠,每个稀释度接种小白鼠6只,每只小白鼠脑内接种0.03ml,观察14天,每天观察小白鼠发病死亡情况。先在受伤部位进行浸润注射,余下的血清进行肌内注射(头部咬伤可注射于颈背部肌内)。
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痰液分泌型IgA
概述:痰中的SIgA为呼吸道上皮组织所分泌,具有防御病原微生物侵袭的作用。(5)抗血清:可用国内特异性好,亲和力强,效价高的抗血清,选择最适稀释度,用0.45μm微孔滤膜过滤。附注:(1)抗原抗体的比例对浊度的影响:当抗原抗体比例相等时,形成的复合物和解离是相等的。(3)抗原抗体反应的溶液。
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胰岛素原
概述:人胰岛素原(proinsulin)是胰岛素的前体物质,由胰岛素和C肽组成,具有双重免疫活性,既可与胰岛素抗抗体结合,又可与C肽抗体结合。(4)0.25%氯胺T:氯胺T25mg溶于标记缓冲液10ml。研究证明,部分表现为高胰岛素血症的2型糖尿病患者其实为高胰岛素原血症,是因为胰岛β细胞功能障碍,胰岛素原分泌增多所致。
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脑脊液髓鞘碱性蛋白
(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。化验结果临床意义:阳性(>2.46μg/L):多发性硬化(MS)、病毒性脑膜炎(散发性脑炎)。
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血浆17α-羟孕酮
概述:17α-羟孕酮(17-α-hydoxyprogesterone,17α-OHP)由肾上腺皮质及性腺产生,其孕酮活性很低。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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促胰腺素
概述:胰泌素(Secretin)是由十二指肠粘膜S细胞和分散在空肠(主要是上端)的S细胞释放的消化道激素(又称促胰液素、胰液素),胰泌素为一碱性多肽,由27个氨基酸组成,与抑胃肽,血管活性肠肽及胰高血糖素的氨基酸序列分别有9、9、14个氨基酸序列完全相同。抗血清同样也要加以严格鉴定,包括其灵敏度、亲和力和特异性。
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十二指肠引流液胰蛋白酶
十二指肠引流液胰蛋白酶的医学检查:检查名称:十二指肠引流液胰蛋白酶分类:体液和排泄物检查胃液和十二指肠引流液检查取材:十二指肠引流液十二指肠引流液胰蛋白酶的测定原理:本法是标记抗原(Ag·)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)的竞争抑制反应,其反应为Ag·+Ag+Ab(Ag·Ab)+(AgAb)。
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抗利尿激素
抗利尿激素与远曲小管和集合管上皮细胞管周膜上的V2受体结合后,通过G蛋白激活膜内的腺苷酸环化酶,使上皮细胞中cAMP的生成增加;大量发汗、严重呕吐或腹泻等情况使机体失水时,血浆晶体渗透压升高,对渗透压感受器刺激增强,可引起抗利尿激素分泌增多,使肾对水的重吸收活动明显增强,对导致尿液浓缩和尿量减少。
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脑脊液纤连蛋白
125I标记率的高低与抗原(蛋白质或多肽)分子中酪氨酸的含量及其在分子中的暴露程度有关。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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脑脊液特异性梅毒螺旋体抗体
概述:梅毒螺旋体(treponemapallidum,TP)属密螺旋体属,是人类梅毒的病原体,梅毒是人类的主要性病之一。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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尿肾上腺素
概述:肾上腺素由肾上腺髓质的嗜铬细胞所分泌,同时分泌有去甲肾上腺上腺上腺素和多巴胺等(肾上腺素是儿茶酚胺的一部分)。本法是特异性沉淀,分离完全,非特异性结合力低。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。
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肿瘤相关抗原
抗血清同样也要加以严格鉴定,包括其灵敏度、亲和力和特异性。正常值:非肿瘤疾病胸腹水:<27kU/L。化验结果临床意义:应用单克隆抗体MG7,MG9,MGb1,MGc1和MGd1的混合物及免疫放射分析法,测定了胸腹水中肿瘤相关抗原MG-Ags,发现胃癌和肺癌患者胸腹水中MG-Ags平均含量及阳性率明显高于结核性胸膜炎、门脉性肝硬化。
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糖链抗原72-4
别名:CA72-4糖链抗原72-4的医学检查:检查名称:糖链抗原72-4分类:血清学检查肿瘤免疫检测取材:血液糖链抗原72-4的测定原理:本法是标记抗原(Ag·)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)的竞争抑制反应,其反应为Ag·+Ag+Ab(Ag·Ab)+(AgAb)。(3)血清CA72-4和CEA联合检测对上述恶性肿瘤的诊断具有互补作用。
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血管紧张素Ⅱ
概述:血管紧张素Ⅱ是肾素作用血管紧张素原产生血管紧张素Ⅰ,再经转化酶的作用而生成。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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MG-AgSS
抗血清同样也要加以严格鉴定,包括其灵敏度、亲和力和特异性。正常值:非肿瘤疾病胸腹水:<27kU/L。化验结果临床意义:应用单克隆抗体MG7,MG9,MGb1,MGc1和MGd1的混合物及免疫放射分析法,测定了胸腹水中肿瘤相关抗原MG-Ags,发现胃癌和肺癌患者胸腹水中MG-Ags平均含量及阳性率明显高于结核性胸膜炎、门脉性肝硬化。
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胰泌素
概述:胰泌素(Secretin)是由十二指肠粘膜S细胞和分散在空肠(主要是上端)的S细胞释放的消化道激素(又称促胰液素、胰液素),胰泌素为一碱性多肽,由27个氨基酸组成,与抑胃肽,血管活性肠肽及胰高血糖素的氨基酸序列分别有9、9、14个氨基酸序列完全相同。抗血清同样也要加以严格鉴定,包括其灵敏度、亲和力和特异性。
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血浆18-羟-脱氧皮质酮
(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。血浆18-OH-DOC增高见于库欣综合征或库欣病,原发性醛固酮增多症,原发性高血压。
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血浆18-羟-皮质酮
概述:血浆18-羟-皮质18-羟-皮质酮为盐皮质激素,其分泌功能受ACTH和肾素、血管紧张素系统双重调节。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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血浆11-脱氧皮质酮
概述:血浆11-脱氧皮质皮质皮质酮属21碳类固醇激素,主要是由肾上腺皮质束状带产生,为盐皮质激素,其分泌功能及作用与18羟-脱氧皮质皮质酮类似。一般先经聚丙烯酰胺电泳鉴定,再用等电聚焦SDS聚丙烯酰胺双相电泳鉴定为单一区带,然后用于免疫动物和核素标记。抗血清同样也要加以严格鉴定,包括其灵敏度、亲和力和特异性。
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CA242
概述:糖类抗原CA242(CA242)是从人结直肠癌细胞系COLO205单克隆抗体发现的,也是一种唾液酸化的鞘糖脂抗原,和CA50共同表达。本法是特异性沉淀,分离完全,非特异性结合力低。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。
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血管紧张肽Ⅰ
概述:血管紧张素Ⅰ是由肾素作用于血管紧张素原转变而来,因此可反映肾素活性。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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鳞状上皮细胞癌抗原
125I标记率的高低与抗原(蛋白质或多肽)分子中酪氨酸的含量及其在分子中的暴露程度有关。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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肠血管活性肽
在消化系统的主要作用是舒张肠道平滑肌,并使食管下段括约肌、Oddi括约肌、肠道平滑肌、肛门内括约肌松弛。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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泪液β2-微球蛋白
标记方法的原则是将纯化抗原和125I加入小试管底部,继将配制的氯胺T快速冲入,混匀振荡1~(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。相关疾病:脑梗死
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积液β2-微球蛋白
(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。恶性肿瘤和系统性红斑狼疮等,其β2-微球蛋白的含量均明显低于结核病、风湿病和淋巴瘤。
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脑脊液血管活性肠肽
概述:CSF中VIP一般认为来源于中枢神经系统,由28个氨基酸组成的神经肽,具有激素和神经介质双重作用。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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细胞角质蛋白19片段
概述:细胞角蛋白是细胞体的中间丝,是细胞结构的主要成分,根据其分子量和双向二维电泳中等电点的不同可以分为20种不同类型,它能在正常上皮、肿瘤细胞、细胞培养中分化不同的上皮细胞表达。一般先经聚丙烯酰胺电泳鉴定,再用等电聚焦SDS聚丙烯酰胺双相电泳鉴定为单一区带,然后用于免疫动物和核素标记。
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β-促黑素细胞激素
概述:人体分泌腺有垂体、甲状腺、肾上腺等,β-促黑素细胞激素直接来源于内分泌腺,所以测定体液中的激素含量更能反映内分泌腺的功能。标记后的抗原要保持其免疫原性。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。
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胰岛细胞膜抗体
概述:胰岛细胞膜抗体(isletcellsurfaceantibody,ICAS)是胰岛细胞膜表面抗原的自身抗体,属IgG抗体,具有脏器特异性,而非种属特异性。标记后的抗原要保持其免疫原性。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。
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胰多肽
概述:胰多肽(panoreatiopolypeptide,PP)是36个氨基酸组成的直链多肽激素,由胰腺的PP细胞分泌。(4)抗体的制备和鉴定RIA中所用的抗体应具有高亲和力和高特异性,制备高价单相抗血清,最好以标记用的纯化抗原免疫动物,制备半抗原的抗血清,需先将半抗原与载体结合,使成免疫原,常用的载体为牛血清白蛋白。
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CA72-4
别名:CA72-4糖链抗原72-4的医学检查:检查名称:糖链抗原72-4分类:血清学检查肿瘤免疫检测取材:血液糖链抗原72-4的测定原理:本法是标记抗原(Ag·)和非标记抗原(Ag)对特异性抗体(Ab)的竞争抑制反应,其反应为Ag·+Ag+Ab(Ag·Ab)+(AgAb)。(3)血清CA72-4和CEA联合检测对上述恶性肿瘤的诊断具有互补作用。