利用电热或红外线烤箱高热烘烤进行灭菌。适用于玻璃、陶瓷等器具，以及不宜用压力蒸汽灭菌的明胶海绵、凡士林、油脂、蜡、石蜡和各种粉剂等物品。不耐高热物品，如棉织品、塑料、合成纤维及橡胶制品等，不可用此法灭菌。
1．灭菌物品应以适当容器盛装，放入烤箱，密闭加热至规定时间(如下表)。明胶海绵加热温度应较低，可加热120℃持续至180～240min。
各种温度干热灭菌所需作用时间
| 温度（℃） | 作用时间（min） |
| 160 | 120~150 |
| 170 | 60~90 |
| 180 | 30~40 |
2．物品包装不宜过大，装放不可超过柜室高度的2/3，各包之间均应留少许空隙，以：利热空气对流。粉剂、油脂、蜡、石蜡等不宜太厚(<2cm)，否则应延长灭菌时间。器械应先洗净，以防污物遇热炭化其上。玻璃器皿应先干燥，放置时勿接触箱壁；灭菌后应待温度降达60℃以下再开启柜门，以防突然遇冷而炸裂。